hrvatski

Optimalizacija parametara uzgoja MPK (Minipig kidney) stanica u monosloju

Radi što boljeg upoznavanja specifičnosti stvaranja biomase MPK stanica u ovom je radu ispitan učinak DMSO-a, kao komponente medija za smrzavanje stanica, te različitih koncentracija telećeg seruma (5% i 10%) na dinamiku rasta MPK stanica uzgajanih u monosloju. Tijekom uzgoja pratili smo i utrošak glukoze, a ispitan je i učinak 1mM deksametazona, u jednom slučaju, odnosno, temperaturnog šoka (50°C, 15 min) u drugom, na biomasu MPK stanica u monosloju. Iz dobivenih rezultata zaključili smo da nakon što je uspješno uspostavljena kultura MPK stanica potvrđen je toksičan učinak DMSO-a. Prirast MPK stanica poslije 7 dana uzgoja uz početnu koncentraciju stanica od 1 x 10^5 stanica/ml (0,2 x 10^5 stanica/cm^2) u mediju za uzgoj s 5% i 10% seruma, znatno je niži u mediju s 5% seruma (2,34 x 10^5 stanica/ml; 0,47 x 10^5 stanica/cm^2) nego u mediju za uzgoj s 10% seruma (6,36 x 10^5 stanica/ml; 1,27 x 10^5 stanica/cm^2). Koncentracija seruma od 5% nepovoljnija je za prihvaćanje MPK stanica za podlogu u odnosu na 10% seruma. Pri početnoj koncentraciji od 1,5 x 10^5 stanica/ml (0,3 x 10^5 stanica/cm^2) homogeni sloj na raspoloživoj površini postignut poslije 7 dana gotovo je identičan kao i pri početnoj koncentraciji od 1,0 x 10^5 stanica/ml (0,2 x 10^5 stanica/cm^2), jer je monosloj u slučaju veće koncentracije stanica prekrio cijelu površinu i nije moglo doći do znatnijeg prirasta, dok se manja koncentracija stanica i dalje razvijala. Daljnjim tretmanom stanice se nisu dalje razmnažale zbog površine kao ograničavajućeg faktora. Praćenjem utroška glukoze utvrđeno je da je za prirast 1 x 10^5 stanica potrebno 2,6 x 10^-3 mmola glukoze. Učinak deksametazona (1 mM) izazivao je u ispitivanom razdoblju nekrotičke promjene, dok su pri temperaturnom šoku (50°C, 15 min) uz nekrotičke vidljive i apoptotičke promjene na stanicama.

životinjske stanice; stanična kultura; MPK stanice; apoptoza

nije evidentirano