hrvatski

Verifikacija reagensa za određivanje koncentracije humanog korionskog gonadotropina metodom imunotesta elektrokemiluminiscencijom

UVOD: Cilj rada bio je provjeriti ponovljivost, utjecaj interferencije hemolize i prenošenje analita (engl. carryover) u metodi za određivanje humanog korionskog gonadotropina (hCG) na analizatoru Cobas e411 (Roche, Mannheim, Germany). MATERIJALI I METODE: Ponovljivost je ispitivana na kontrolnim uzorcima (Preci Control Universal 1 i 2) u dvije koncentracijske razine tijekom pet dana u triplikatu. Korišteni su kriteriji prihvatljivosti proizvođača: CV(PCU1)=2, 1% ; CV(PCU2)=4, 0%. Utjecaj hemolize ispitan je na tri koncentracijske razine hCG-a prema CLSI protokolu EP7-A2. Hemolizat plazme pripremljen je metodom osmotskog šoka. Hemolitični uzorci su pripremljeni dodavanjem hemolizata u rastućem koncentracijskom nizu do konačnih koncentracija slobodnog hemoglobina od 0 (bez hemolizata), 2, 5 ; 5, 0 ; 7, 5 i 10, 0 g/L hemoglobina. Za procjenu utjecaja interferencije hemolize, korišteni su kriteriji prihvatljivosti RCPA (engl. Royal College of Pathologists of Australasia): ±1 IU/L za hCG <10, 0 IU/L ; ±10% za hCG >10, 0 IU/L. Prenošenje analita ispitano je analizom uzorka niske koncentracije hCG-a u triplikatu, neposredno nakon uzorka visoke koncentracije u duplikatu, prema IUPAC (engl. International Union of Pure and Applied Chemistry) protokolu. Svi uzorci analizirani su na analizatoru Cobas e411 originalnim reagensom. Statistička obrada podataka napravljena je pomoću programa Microsoft Excel. REZULTATI: Za nižu koncentracijsku razinu ponovljivost je bila izvan dozvoljenih kriterija (2, 8% za PCU1 i 1, 5% za PCU2). U ispitivanju utjecaja hemolize, najveća odstupanja na koncentracijskim razinama 181 mU/mL i 3076 mU/mL iznosila su 6, 1% i -7, 5%. U uzorcima s niskom koncentracijom hCG-a (7, 9 mU/mL) odstupanje je bilo veće od 1 IU/L za koncentracije Hb > 5 g/L. U ispitivanju prenošenja analita nije dokazan porast koncentracije hCG-a u uzorku s niskom koncentracijom. ZAKLJUČAK: Metoda za određivanje hCG-a ima zadovoljavajuću ponovljivost. Utjecaj hemolize je klinički značajan isključivo u uzorcima s nižim koncentracijama analita pri koncentraciji hemoglobina iznad 5 g/L. Kod određivanja hCG-a nema prenošenja analita s uzorka visoke koncentracije.

hCG, verifikacija, hemoliza, prenošenje analita, usporedivost metoda, nepreciznost, Roche cobas e411

nije evidentirano