hrvatski

Određivanje promjene u ekspresiji gena citokroma C u stanicama izloženim derivatima N-9 sulfonilurea

Uvod: Tumori su veliki javnozdravstveni problem. Iz dana u dan raste rezistencija na lijekove te time nameće potrebu za sintezom novih. Novosintetizirani derivati N-9 sulfonilureje pokazuju veliki protutumorski potencijal. Ciljevi istraživanja: Ispitati učinke novosintetiziranih derivata N-9-sulfonilureje (R-191 i D7-23) na HeLa i K562 stanicama u uvjetima in vitro. Materijali i metode: Novosintetizirani derivati N-9-sulfonilurea sintetizirani su na Zavodu za organsku kemiju i biokemiju u Zagrebu na Institutu Ruđera Boškovića. U istraživanju su korišteni R-191 i D7-23 spojevi koji su se pokazali kao najzanimljiviji. Komercijalne stanice HeLa (2D i 3D) i K562 uzgajane su u bočicama za uzgoj kulture stanica u CO2 inkubatoru na 37°C. Nakon uzgoja stanice su odvojene tripsinom te je izolirana RNA pomoću RNeasy Mini Kit (50) proizvođača Qiagen. Za potrebe istraživanja koristili smo TaKaRa – PrimeScript First Strand cDNA Synthesis Kit za prepisivanje RNA u cDNA te QuantStudio5 RT-PCR za analizu genske ekspresije. Rezultati: R-191 derivat pri koncentraciji od 5x10-6 M pokazao je povišenu ekspresiju gena kod HeLa staničnih linija uzgojenih u monosloju i 3D kulturi stanica. R-191 derivat nema utjecaj na ekspresiju gena kod K562 stanične linije. D7-23 derivat povisuje ekspresiju gena u 2D kulturi HeLa stanica i K562 stanicama dok snižava ekspresiju citokroma c u 3D kulturi HeLa stanica. Zaključak: Dokazano je da ispitivani derivati mijenjaju razinu ekspresije gena citokroma c pod utjecajem derivata N-9-sulfoniureje.

apoptoza, citokrom c, ekspresija gena, kultura stanica, sulfonilurea, tumori

nije evidentirano