hrvatski

Elektroforeza u istraživanju kompleksa seril-tRNA-sintetaza s tRNASer

Aminoacil-tRNA-sintetaze visokospecifično aciliraju tRNA pripadnom aminokiselinom i stoga su presudne za pravilnu biosintezu proteina u stanici. Nastajanje nekovalentnog kompleksa između aminoacil-tRNA sintetaze i pripadne tRNA važan je korak u tom procesu. U ovom radu istraživani su kompleksi seril-tRNA sintetaza iz kvasca, Methanococcus maripaludis i organela kukuruza nativnom elektroforezom na poliakrilamidnom gelu. Zonskom interferencijskom elektroforezom detektirani su kompleksi SerRS iz kvasca i organela kukuruza koje nije bilo moguće detektirati gel retardacijskom elektroforezom. Diskutirana je njihova stabilnost i kinetika disocijacije u elektroforetskim uvijetima. Pokazano je da se ukupna tRNA može koristiti za detekciju specifičnih kompleksa. Fergusonovom analizom određena je molekulska masa nativne SerRS iz organela kukuruza i M. maripaludis, te molekulska masa kompleksa kvaščeve SerRS i kovalentno vezane tRNASer. Zaključeno je da se radi o kompleksima SerRS∙tRNASer i SerRS∙(tRNASer)2.

Fergusonovi grafovi; gel-retardacijska elektroforeza; kovalentno povezivanje; nativna PAGE; seril-tRNA-sintetaza; zonska interferencijska elektroforeza

nije evidentirano