Metode ispitivanja metabolički stabilnih spojeva (CROSBI ID 412755)
Ocjenski rad | diplomski rad
Podaci o odgovornosti
Jurmanović, Sanja
Mildner, Boris
Milić, Astrid
hrvatski
Metode ispitivanja metabolički stabilnih spojeva
Određivanje in vitro metaboličke stabilnosti predstavlja jedan od važnih koraka u ranoj fazi istraživanja novih lijekova, pri čemu poseban izazov predstavljaju vrlo stabilni spojevi. U ovom radu je razvijena tzv. metoda produžene inkubacije spojeva (engl. relay assay) u štakorskim hepatocitima, a u cilju preciznijeg određivanja intrinzičkog klirensa upravo metabolički stabilnih spojeva, tj. spojeva vrlo niskog klirensa. U tu je svrhu korišteno 9 komercijalnih spojeva (ranitidin, kofein, cimetidin, acebutolol, feksofenadin, antipirin, teofilin, tolbutamid, varfarin) koji su pokazali niski klirens, kako u standardnom pokusu određivanja metaboličke stabilnosti u štakorskim hepatocitima unutar 3 sata, tako i prema klasifikaciji metaboličke stabilnosti na temelju postotka početnog spoja u 90-toj minuti inkubacije. Metodom produžene inkubacije spojeva s hepatocitima prevladana je prepreka gubitka aktivnosti enzima u hepatocitima na način da se na kraju optimalnog vremena inkubacije (4 h) supernatant inkubacije prebacuje na svježe otopljene hepatocite. U konačnici, in vitro hepatički klirens spojeva određen je koristeći ciklus od 4 pokusa, s ukupnim vremenom inkubacije od 16 h. Dobiveni rezultati potvrđuju da se metoda produžene inkubacije uspješno može koristiti, kako u ranim fazama, tako i u kasnijim fazama otkrivanja novih lijekova, za predviđanje ponašanja metabolički stabilnih spojeva u štakorskom i humanom in vivo sustavu. Metoda je visokoprotočna, relativno niske cijene, te se lako može uklopiti u laboratorije koji se bave ispitivanjem metabolizma lijekova i farmakokinetikom (engl. drug metabolism and pharmacokinetics, DMPK) bez dodatnog ulaganja u instrumentaciju.
hepatociti/klirens ; LC-MS/MS ; metabolička stabilnost ; “relay“ metoda
nije evidentirano
engleski
Test methods for metabolically stable compounds
nije evidentirano
clearance ; hepatocytes ; LC-MS/MS ; metabolic stability ; relay method
nije evidentirano
Podaci o izdanju
86
27.11.2015.
obranjeno
Podaci o ustanovi koja je dodijelila akademski stupanj
Prirodoslovno-matematički fakultet, Zagreb
Zagreb, Hrvatska