Separacija bioloških makromolekula na monolitnim kromatografskim medijima (CROSBI ID 412081)
Ocjenski rad | doktorska disertacija
Podaci o odgovornosti
Branović, Karmen
Benko, Bojan ; Josić, Đuro
hrvatski
Separacija bioloških makromolekula na monolitnim kromatografskim medijima
Monoliti predstavljaju novu generaciju stacionarne faze u tekućinskoj kromatografiji. Zbog specifičnih hidrodinamskih svojstava, monoliti omogućavaju separacije makromolekula koje su za nekoliko redova veličine brže od standardnih, konvencionalnih gelova. U ovom radu pokazana je uspješna primjena monolita za separaciju proteina iz biološki komplicirane smjese kao što je plazma. Kao modelni proteini koristili su se koagulacijski faktor IX i imunoglobulin G. Separacija faktora IX i vitronektina (prateći protein plazme u komercijalnom preparatu faktora IX) provedena je na analitičkom i preparativnom nivou. Pri tome je specifična aktivnost faktora IX povećana više od 4 puta u odnosu na konvencionalne nosače. Separacija imunoglobulina G od pratećih proteina-albumina i transferina, provedena je na analitičkom nivou. Za tu separaciju razvijena je nova metoda procesne provjere imunoglobulinskog preparata tzv. sekvencijalna kromatografija. Sekvencionalna kromatografija sastoji se od afinitetne kromatografije i ionske izmjene izvedenih neposredno jedna iza druge jer se u isto kućište stavi afinitetni CIM Protein G disk (monolit) i anionski izmjenjivač CIM QA disk (monolit). Mijenjanjem uvjeta separacije moguće je u jednom koraku za samo 5 minuta odvojiti sva tri proteina i pri tome kvantificirati količinu transferina i albumina.
monoliti, kromatografija, koagulacijski faktor IX, vitronektin, imunoglobulinG
nije evidentirano
engleski
Separation of biological macromolecules on monolithic chromatographic media
nije evidentirano
monoliths, chromatography, factor IX, vitronectin, immunoglobulin G
nije evidentirano
Podaci o izdanju
123
03.12.2001.
obranjeno
Podaci o ustanovi koja je dodijelila akademski stupanj
Prirodoslovno-matematički fakultet, Zagreb
Zagreb