hrvatski

Verifikacija potpuno automatizirane metode za određivanje Anti-Mullerian hormona u serumu na automatskom analizatoru Roche Cobas e601

Uvod: Anti-Mullerian hormon (AMH) se najčešće koristi za procjenu ovarijske rezerve i odgovora na kontroliranu stimulaciju jajnika što zahtjeva pravovremeno izdavanje nalaza. U našem laboratoriju AMH se određivao jednom mjesečno modificiranom AMH Gen II (Beckman Coulter, Republika Češka) ELISA metodom na analizatoru Elisys Duo (Human, Njemačka). Cilj je bio verifikacija potpuno automatizirane elektrokemiluminiscentne metode (ECLIA) za određivanje AMH u serumu na analizatoru Roche Cobas e601 (Roche, Njemačka) i usporedba s rutinskom AMH Gen II ELISA metodom. Materijali i metode: Verifikacija metode je obuhvatila slijedeće parametre: preciznost u seriji (ponovljivost), preciznost iz dana u dan (međupreciznost)i usporedbu s rutinskom ELISA metodom koju je iproizvođač koristio u postupku validacije metode.Za ispitivanje preciznosti kroz 5 dana u triplikatu su analizirani uzorci seruma pacijenata s koncentracijama AMH (Uzorak 1=6, 38 pmol/L i Uzorak 2=21, 67pmol/L) blizu koncentracija humanih uzoraka na kojima je proizvođač deklarirao preciznosti (5, 31 pmol/L i 18, 20 pmol/L). Usporedba metoda prevedena je na 40 uzoraka seruma (raspon koncentracija 0, 92-38, 6 pmol/L), a dobiveni rezultati su statistički obrađeni korištenjem Passing-Bablok i BlandAltman analize u programu MedCalc (Mariakerke, Belgija). Rezultati: Dobiveni koeficijenti varijacije za ponovljivost (CVp) bili su 0, 65% i 0, 65% (deklarirani CVp: 1, 1% i 1, 2%), a za međupreciznost (CVm) 0, 81% i 1, 8% (deklarirani CVm 4, 0% i 3, 3%). Regresijskom analizom prema Passing-Babloku dobiveno je: y(Roche)=0, 39(95%CI (-1, 31)-0, 83)+0, 77(95%CI 0, 67- 0, 94)x. Na Bland-Altman prikazu razlika srednjih vrijednosti u prosjeku je iznosila 2, 5 pmol/L ((95%CI(-4, 3)-9, 4) uz najveće, ujedno i klinički značajne razlike u koncentracijskom području od 10-20 pmol/L tj. na granici između smanjene i optimalne plodnosti. Zaključak: Verifikacijom preciznosti dobiveni su rezultati koji zadovoljavaju specifikacije proizvođača. Razlike između metoda dobivene usporednom analizom potvrdile su prije objavljene podatke o slaboj usporedivosti metoda. Zbog potpune automatizacije, mogućnosti svakodnevnog izdavanja nalaze i izvrsne preciznosti AMH ECLIA metoda je uvedena u rutinski rad.

Anti-Mullerian hormona, ELISA metoda, elektrokemiluminiscentna metoda

nije evidentirano