hrvatski

Uloga dipeptidil-peptidaza 8 i 9 u pokusnom modelu Crohnove bolesti u CD26 deficijentnom mišu

Crohnova bolest (CB) kronična je i nekontrolirana upala crijeva koja se razvija kao neadekvatan imunosni odgovor na neki od okolišnih čimbenika u genski podložnoj osobi. Dipeptidil-peptidaza IV/CD26 (DPP IV/CD26) svojim je proteolitičkim učincima na širok spektar imunomodulacijskih supstrata i kostimulacijskom funkcijom uključena u patogenezu CB, no uloga srodnih proteina, dipeptidil-peptidaza (DP) 8 i 9 nije još razjašnjena. Cilj ovog istraživanja bio je ispitati utjecaj razvoja pokusnog modela kolitisa na lokalne i sistemske promjene genskog i proteinskog izražaja ovih enzima i njihovih susptrata, peptida YY (PYY) i susptance P (SP) čija je uloga u CB također indicirana. U CD26 deficijentnim (CD26-/-) i C57BL/6 miševima izazvan je TNBS-kolitis, a miševi su žrtvovani 2. (upala), 7. (cijeljenje). i 20. (oporavak) dana nakon tretmana. Praćene su kliničke promjene i tjelesna masa, a stupanj oštećenja debeloga crijeva određen je patohistološkom i histomorfometrijskom analizom. Transkripcijska aktivnost gena za DP8, DP9, DPP IV/CD26, PYY i SP određena je u debelome crijevu qPCRom, a proteinski izražaj ELISA testovima u debelome crijevu i serumu. DPP IV/CD26-slična i DP8/9 enzimska aktivnost određene su spektrofotometrijski u debelome crijevu i serumu uz upotrebu inhibitora DP8/9 odnosno DPP IV/CD26. Na temelju kliničkih parametara, gubitka mase, hepatosomatskog indeksa i značajnog skraćenja crijeva u miševima žrtvovanima 2. dana te karakterističnih patohistoških promjena, zaključeno je da oba soja miševa razvijaju TNBS-kolitis. Izražaj mRNA DPP IV/CD26, DP8 i DP9 u CD26-/- miševima nije značajno varirao u upali, dok je u C57BL/6 miševima 2. dana uočeno smanjenje DP9, a 7. dana DP8 (P < 0, 05). Crijevna koncentracija DP8 i DP9 značajno je veća (P < 0, 05) u CD26-/- miševima, čime se potvrđuje hipoteza o up- regulaciji, no u C57BL/6 miševima rezultira većom promjenom u upalnom stanju. Suprotno očekivanjima, u serumu je izmjerena značajna koncentracija intracelularnih DP8 i DP9, a u crijevu DP8/9 aktivnost koja se smanjuje 2. dana. Aktivnost i izražaj DPP IV/CD26 smanjeni su u upali i lokalno i sistemski, što je u skladu s prethodnim istraživanjima. Obrazac promjene transkripcijske aktivnosti gena za PYY 2. dana različit je među sojevima, dok se SP povećava u oba. Koncentracija PYY i SP u crijevu slijedi promjene na genskoj razini, a TNBS-kolitis jače je utjecao na promjenu sistemske SP. TNBS-kolitis uzrokuje promjene u genskom i proteinskom izražaju DP8 i DP9 na lokalnoj i sistemskoj razini čime se može zaključiti da su ove molekule uključene u procese nastanka upale i/ili cijeljenja crijevne sluznice, osobito u odsustvu DPP IV/CD26.

Crohnova bolest, dipeptidil-peptidaza IV/CD26, dipeptidil-peptidaza 8 ; dipeptidil-peptidaza 9, peptid YY, pokusni model kolitisa, supstanca P.

nije evidentirano