hrvatski

Razvoj i primjena brze mikrometode određivanja i praćenja oštećenja DNA u škrgama dagnje Mytilus galloprovinciallis (Lamarc, 1819)

Zbog potrebe praćenja promjena u okolišu uzrokovanih kontiuiranim odlaganjem genotoksičnih zagađivala u morski ekološki susstav ukazuje se potreba za razvojem jednostavnih i brzih metoda određivanja njihove akumulacije i učinaka. Stoga je razvijena brza mikrometoda (Fast Micromethod) određivanja oštećenja DNA u suspenziji stanica i homogenatima tkiva sisavaca te morskih beskralješnjaka (dagnja, Mytilus galloprovincoiallis). Metoda se zasniva na sposobnosti flourokromatskog bojila PicoGreen-a da se i u prisustvu jeednolančane DNA, RNA i proteina u alkalnim uvjetima postojano veže za dvolančanu DNA, što omogućava izravno praćenje denaturacije dvolančane DNA bez prethodne izolacije i pročišćivanja uzorka. Opisanom analitičkom tehnikom može se na brz i jednostavan način u maloj količini uzorka (3000 stanica ; 2.5 ng DNA) i uporabu mikroploča odrediti cjelovitost DNA odnosno, može se pratiti denaturacija dvolančane DNA u alkalnim uvjetima tijekom vremena. Brza mikrometoda (Fast Micromethod) primjenjuje se u meeicinskim ispitivanjima, u biomonitoringu genotoksičnih zagađivala i u procjeni njihovog učinka na sesilne bioindikatorske organizme u moru kao i predviđanju smjera promjena i nastanka štetnih posljedica u ekološkom svijetu.

biomonitoring; brza mikrometoda; cjelovitost DNA; dagnja; oštećenja DNA

nije evidentirano