hrvatski

Utjecaj dimerizacije Nix/Bnip3L receptora na mitofagiju

Mitofagija je važan proces kojim stanica uklanja oštećene mitohondrije. Protein Nix ima važnu ulogu u mitofagiji kao receptor te se pretpostavlja da se aktivira dimerizacijom. Cilj ovoga istraživanja bio je utvrditi da li fosforilacija serinskog ostataka S212 na C- terminalnom kraju mitohondrijskog proteina Nix utječe na njegovu dimerizaciju, a samim time i njegovu funkciju. U tu svrhu upotrijebljeni su konstrukti EGFP-NixWT, EGFP-NixS212A i EGFP-NixS212E. GST pull-down metodom određena je interakcija EGFP-Nix proteinskih mutanata s autofagijskim proteinom LC3A. Imunofluorescencijskom mikroskopijom promatrana je kolokalizacija mutanata proteina Nix i proteina vanjske mitohondrijske membrane Tom20 kako bi se utvrdio pravilan smještaj proteina Nix u vanjskoj mitohondrijskoj membrani. Imunofluorescencijska mikroskopija upotrebljena je i za promatranje kolokalizacije autofagosomalnog proteina LC3A i mutanata proteina Nix. Rezultati su pokazali da mutante proteina Nix, upotrijebljene u eksperimentu, ostvaruju interakciju sa autofagosomalniim proteinom LC3A. Imunofluorescencijskom mikroskopijom dokazano je da su mutante proteina Nix lokalizirane na vanjskoj mitohondrijskoj membrani što ukazuje da promijena aminokiselinskog slijeda ne mijenja njegovu lokalizaciju na mitohondriju. Za potvrdu uloge fosforiliranog serina S212 te njegov utjecaj na dimerizaciju i funkciju Nix proteina potrebni su dodatni eksperimenti.

mitofagija; protein Nix; dimerizacija; fosforilacija

nije evidentirano