hrvatski

Određivanje niskih koncentracija etanola (< 0, 5 g/L) u slini, serumu i urinu nakon konzumacije alkoholnih pića

Etanol, C2H5OH, vrlo često pronalazi mjesto u pićima koja se konzumiraju u različitim prigodama. Od mnogih učinaka etanola na organizam neki su opće prihvaćeni kao ugodni i jedan od razloga konzumiranja etanola. No, etanol ima ponajviše štetnih učinaka zbog čega predstavlja važnu pretragu u medicinsko- biokemijskim, toksikološkim i forenzičkim laboratorijima.Ovim istraživanjem nastojali smo procijeniti distribuciju etanola u tjelesnim tekućinama i utjecaj na organizam nakon unosa malih količina etanola kakve su česte u društvu. Distribuciju i odnose u tjelesnim tekućinama, kao i dinamiku u vremenu ispitali smo enzimskom metodom s ADH i referentnom kromatografskom metodom (GC), što nam je ujedno omogućilo i njihovu usporedbu u niskim koncentracijskim područjima < 0, 5 g/L. Skupini 10 zdravih, trijeznih i sitih dobrovoljaca životne dobi od 21 do 28 godina uzorkovani su slina (S), krv (K) i urin (U) 20 i 90 minuta nakon konzumiranja 50 mL žestokog alkoholnog pića (15, 78 g etanola). Enzimskom i GC metodom određene su koncentracije etanola u uzorcima (iz krvi je centrifugiranjem odvojen serum za analizu), a ujedno su zabilježeni subjektivni iskazi ispitanika i klinički znakovi utjecaja etanola na ispitanike. Pokusu je prethodio pilot- pokus u kojem je ispitanicima izmjerena koncentracija etanola u slini u razmacima od 30 min nakon konzumiranja 5 čokoladnih pralina punjenih konjakom (2, 55 g etanola). S obje metode utvrđena je koncentracija ispod granice detekcije i granice kvantifikacije. Glavni pokus: U svim uzorcima i točkama mjerenja izmjerene su koncentracije etanola < 0, 5 g/L, a metode su pokazale visok stupanj korelacije (r>0, 95 ; P<0, 0001). Wilcoxonov test pokazao je da GC metoda daje značajno niže koncentracije (P<0, 001). Bland-Altmanova analiza potvrdila je negativnu srednju vrijednost razlika mjerenja u g/L (S:-0, 027 ; K:-0, 056 ; U:-0, 048), a razlika mjerenja na donjoj granici 95% intervala pouzdanosti opravdava podudarnost metoda samo za uzorke sline. Ustanovljene su očekivane razlike u koncentracijama u odnosu na spol i tjelesnu masu te su veće koncentracije izmjerene u ispitanika ženskog spola i ispitanika manje tjelesne mase. Utvrđeni su objektivni i subjektivni klinički pokazatelji različitog intenziteta nakon 20 min, dok nisu opaženi nakon 90 min, iako je više od polovice ispitanika imalo veću koncentraciju nakon 90 min nego nakon 20 min. Nađena je snažna povezanost koncentracija etanola u serumu i slini, jednako za obje metode 43 (R2=0, 949 ; P<0, 0001) što otvara mogućnosti za primjenu sline kao jednostavnije i neinvazivne metode uzorkovanja u kliničkim i toksikološkim laboratorijma. Tim više što je utvrđena prihvatljiva podudarnost metoda upravo u uzorcima sline. Koncentracije u urinu pak slabo i statistički neznačajno koreliraju s koncentracijama u serumu i slini (r= 0, 433 do 0, 497). Kod svih ispitanika utvrđene su koncentracije koje ne prelaze sadašnjim zakonom dopuštene količine. Najveća izmjerena koncentracija bila je 0, 44 g/L nakon 20 min te 0, 27 g/L nakon 90 min. Zaključno, zbog velike intraindividualne razlike ispitanicima nije moguće predvidjeti sadržaj etanola u organizmu sat i pol nakon uzimanja čašice žestokog alkoholnog pića, ali je sigurno da imaju mjerljive količine, odnosno da su pod utjecajem alkohola. Stoga, oprez čak i kod društveno uobičajenog konzumiranja alkoholnih pića, s osvješćenošću da neka radna mjesta ne toleriraju koncentraciju do 0, 5 g/L te da mnoge zemlje nemaju dopuštenu količinu alkohola u prometu.

analiza etanola ; headspace plinska kromatografija ; etanol u serumu ; etanol u slini ; etanol u urinu

Studentski znanstveni rad nagrađen Rektorovom nagradom Sveučilišta u Zagrebu za akademsku godinu 2015./2016. Mentor: Nada Vrkić