hrvatski

Višestruka alel specifična lančana reakcija polimerazom/kapilarna elektroforeza ; Cistična fibroza

Cistična fibroza (CF) ili mukoviscidoza jest autosomno recesivno nasljedna multisistemska bolest koja zahvaća brojne epitelne organe, a osobito egzokrine žlijezde. Incidencija bolesti u sjeverozapadnoj je Europi i SAD-u 1:3000 pa se u tom dijelu svijeta CF smatra najčešćom recesivno nasljednom bolešću koja značajno skraćuje životni vijek pripadnicima bijele rase. Učestalost heterozigotnih prenosilaca je oko 1 na 20 do 25 osoba. Višestruka alel specifična lančana reakcija polimerazom (engl. Multiplex allele-specific Polymerase Chain Reaction, MAS-PCR) je jednostavna i pouzdana metoda detekcije poznatih mutacija i polimorfizama jednog nukleotida (engl. Single nucleotide polymorphism, SNP). Za MAS-PCR koriste se fluorescentno obilježene alel specifične (AS) početnice koje su dizajnirane tako da na 3’ kraju odgovaraju jednom od alela. Do sinteze DNA i stvaranja PCR produkta dolazi samo ako je kalup potpuno komplementaran početnici. Alel specifični PCR generira fluorescentno obilježene fragmente koji se analiziraju metodom kapilarne elektroforeze. Amplificirani produkti se identificiraju na temelju veličine i fluorescencije.

Cistična fibroza, kapilarna elektroforeza

nije evidentirano