hrvatski

Validacija metode tekućinske kromatografije visoke djelotvornosti za mjerenje antifungalnog lijeka vorikonazola u serumu

Vorikonazol je triazolni antifungalni lijek sa širokim spektrom djelovanja za invazivne gljivične infekcije. Metabolizira se u N-okside uglavnom preko izoenzima citokroma P450: CYP 3A4 i CYP 2C19. Zbog genetičkih polimorfizama CYP 2C19, nelinearne, saturacijske farmakokinetike i brojnih interakcija između lijekova standardne doze vorikonazola ne dovode do očekivane koncentracije i stoga se preporuča terapijsko praćenje. Cilj ovog rada bio je razviti i validirati metodu tekućinske kromatografije visoke djelotvornosti za terapijsko praćenje vorikonazola u serumu. Uzorak seruma (250 µL) i kloramfenikol kao interni standard (25 µL) su prethodno obrađeni tekućinskom ekstrakcijom s etil acetat /heksanom pri lužnatom pH. Organski sloj se upari, a ostatak se otopi u 200 µL mobilne faze. Analiti se razdvajaju izokratno, primjenom reverzne-faze na koloni C18, 250 x 4, 6 mm ID 5µm (Macherey-Nagel). Za razdvajanje je korištena mobilna faza fosfatni pufer / acetonitril / metanol (pH 4, 6) i protok od 1, 5 ml/min. Analiti su kvantificirani detektorom s nizom dioda na 254 nm. Sve kalibracijske krivulje pokazale su dobru linearnost (r>0, 998) u rasponu od 0, 1- 10 mg/L. Preciznost u seriji u dva nivoa koncentracija bila je 2, 45% i 5, 44%. Preciznost između serija bila je 7, 56% i 6, 11%. Točnost, izražena kao postotak pogreške, bila je u rasponu od 97, 3-106, 8%. Granica kvantifikacije je 0, 038 mg/L, a granica detekcije 0, 013 mg/L. Metoda je primijenjena za mjerenje vorikonazola u uzorcima seruma bolesnika. Na temelju analitičkih parametara: linearnosti, preciznosti, točnosti, granice detekcije i kvantifikacije predstavljena metoda je pogodna za terapijsko praćenje lijeka i farmakokinetičke studije. Metoda pokazuje dobru specifičnost prema drugim propisanim lijekovima. Vorikonazol ima visok stupanj varijabilnosti i sugerira se terapijsko praćenje lijeka za poboljšanje učinkovitosti i smanjenje toksičnosti.

vorikonazol ; validacija ; HPLC

nije evidentirano