hrvatski

Izolacija i inhibicija enzima tirozinaze iz banane (Musa paradisica) i batata (Ipomonea batates)

Ovaj eksperiment uključuje djelomičnu izolaciju enzima tirozinaze iz batata i banane nakon čega slijedi mjerenje njegove aktivnosti i ispitivanje inhibitorski svojstava. Enzim tirozinaza je prilično sveprisutan te se nalazi u gotovo svim stanicama. Katalitičko djelovanje ovog enzima je pretvorba tirozina + O2 u dihidroksifenilalanin (DOPA) koji se potom pretvara u dopakinon + H2 O. Dopakinon se može pretvoriti u dopakrom (crveno- narančasti pigment nađen u crvenokosih ljudi). Potom se dopakrom može pretvoriti u crno/smeđe pigmente melanina (pronađen u gotovo svim ljudskim stanicama kože). Tirozinaza katalizira prve dvije reakcije, prvenstveno oksidaciju tirozina te nakon tog oksidaciju DOPA u dopakinon. Dopakrom se spontano formira iz dopakinona. Aktivnost enzima može biti praćena analiziranjem nestanka tirozina i/ili DOPA (supstrata) ili pojave dopakroma (produkta) ili praćenjem potrošnje kisika ili proizvodnje ugljikovog dioksida. Psiholozi i kemičari dugo preferiraju manometrijsko određivanje izmjene kisika i plinova, ali je puno jednostavnije mjeriti pojavu pigmenta dopakroma na apsorpcijskom maksimumu od 475 nm. Ova apsorbancija omogućava upotrebu standardnih spektrofotometrijskih analiza analizirajući stupanj formiranja dopakroma iz supstrata DOPA. Inhibitori su tvari koje smanjuju enzimsku aktivnost. Aktivnost nekog enzima regulirana je povratnim mehanizmom kao što produkt inhibira enzim u početnoj fazi reakcije. Inhibicija enzima regulira količinu nastalog produkta. Inhibicija završava kada koncentracija inhibitora prijeđe koncentraciju enzima.

izolacija i inhibicija enzima ; tirozinaza

nije evidentirano