hrvatski

Određivanje 10-hidroksi-2-decenske kiseline u proizvodima s matičnom mliječi

Matična mliječ je prirodni eliksir koji čuva zdravlje i vitalnost čovjeka. Od njezinih mnogobrojnih sastojaka izdvaja se 10-hidroksi-2-decenska kiselina (10-HDA), u prirodi prisutna samo u matičnoj mliječi. Ona ima važne biološke učinke od kojih se izdvajaju antibakterijsko, protuupalno i imunmodulatorsko djelovanje. Sadržaj 10-HDA određuje kvalitetu matične mliječi, njezinu učinkovitost kao i učinkovitost proizvoda u koji je ugrađena kao sastavna komponenta. Zbog netočnog deklariranja te čestog krivotvorenja, javila se potreba za sustavnom kontrolom proizvoda s matičnom mliječi, posebno dodataka prehrani i kozmetike. Cilj našeg rada bio je optimizirati HPLC metodu za određivanje 10-HDA kako bi se rutinski mogla vršiti kontrola kvalitete matične mliječi, kao sirovine i kao sastavne komponente u gotovim farmaceutskim i kozmetičkim proizvodima. Validirana HPLC metoda s DAD detektorom (Diode Array Detector) za kvantitativno određivanje 10-HDA provodila se na C18 koloni izokratnom eluacijom pri valnoj duljini 210 nm. Mobilna faza sastojala se od jednakih udjela metanola i vode zakiseljenih s ortofosfatnom kiselinom (w = 0, 5 %). Identifikacija se provodila usporedbom vremena zadržavanja i UV spektra uzorka i odgovarajućeg standarda 10-HDA. Uzorci za ispitivanje su otopljeni ili razjeđeni vodom što je posljedično imalo eluiranje komponenti topljivih u vodi i nesimetričnost pika 10-HDA. Dodatnim zakiseljavanjem mobilne faze do 0, 6 % potisnuta je ionizacija karboksilne skupine 10-HDA što je ravnotežu pomaklo prema stacionarnoj fazi čime je postignuto optimalno zadržavanje i dobra simetrija pika 10-HDA. Linearnost je zadržana u koncentracijskom rasponu od 0, 13–100 μg/mL(R > 0, 999) uz granica dokazivanja (LOD) 0, 048 μg/mL te granicu kvantifikacije (LOQ) 0, 145 μg/mL. Preciznost metode ispitana je dodatno kroz ponovljivost mjerenjem tri različite koncentracije unutar jednog dana (RSD < 0, 46 %), a srednja preciznost mjerenjem tri različite koncentracije tijekom tri dana (RSD < 1, 22 %). Točnost metode ispitana je analizom tri različita koncentracijska nivoa (analitički prinosi 98, 8—99, 6 %). Izdržljivost metode ispitana je promjenama valne duljine detekcije i temperature pri čemu su dobiveni zadovoljavajući rezultati. Zaključak: Optimizacija predočene HPLC metode pokazala se vrlo učinkovitom za rutinsko kvantitativno određivanje 10-HDA u matičnoj mliječi i različitim proizvodima koji je sadrže. Analitika je pokazala da neki proizvodi gdje je deklarirana svježa matična mliječ kao i neki kozmetički proizvodi ne sadarže 10-HDA što postavlja pitanje učinkovitosti, stabilnosti ili krive deklaracije proizvoda.

10-hidroksi-2-decenska kiselina; Matična mliječ; validacija analitičke metode; HPLC

nije evidentirano