engleski

EFFECT OF COCOA POLYPHENOLS ON THE MODULATION OF CARBON TETRACHLORIDE (CCl4)-INDUCED LIVER DAMAGE IN MICE

Kakao je hrana bogata polifenolima, osobito flavonoidima koji imaju antioksidativno i protuupalno djelovanje. Već je poznato da zbog antioksidativnog djelovanja polifenoli štite od reaktivnih kisikovih spojeva (ROS) koji su uključeni u etiologiju mnogih degenerativnih bolesti. Međutim, malo je poznato o njihovom utjecaju na bolesti jetre. Svrha ovog istraživanja bila je istražiti moguće korisne učinke ekstrakta kakao polifenola i epikatehina kod akutne hepatotoksičnosti u miševa, izazvane tetraklorugljikom (CCl4). Nakon tretmana s CCl4 (1 mg/kg), miševi su posttretirani ekstraktom kakao polifenola (CE ; 3, 37 mg/kg) i epikatehinom (EC ; 2, 24 mg/kg). Histopatološka analiza bojanjem s hematoksilin i eozinom (HE), pokazala je centribularne nekrotične promjene u jetri miševa tretiranih s CCl4. Kakao polifenoli i epikatehin utjecali su pozitivno na remodeliranje oštećenog tkiva i povrat funkcionalnosti jetre. Frakcionacijom mišje jetre lokalizirani su redoks proteini, superoksid dismutaza (SOD) u mitohondriju, katalaza (CAT) i glutation peroksidaza (GPx) u citosolu. Ukupni proteinski tioli (TPT) u mitohondriju i citosolu. Razlike između skupina ispitane su pomoću neparametrijskog Kruskal-Wallis testa i između dvije skupine Mann-Whitney U-testom. Elektroforeza, na poliakrilamidnim gelu (4-8% i 4-12%) uz natrijev dodecilsulfat (SDS-PAGE), je korištena za odjeljivanje proteina u istraživanim skupinama te za lokaciju i određivanje razlika proteina između staničnih frakcija. Membranska komatografija ionske izmjene s jakim anionskim izmjenjivačem (AIEX) tipa Q, korištena je za selektivno odjeljivanje proteina prema izoelektričnoj točki u rasponu 6, 4-7, 4. Značajna promjena među skupinama (kontrola, CCl4, CE, EC) pronađena je na razini ukupnih proteina u frakciji mitohondrija, u aktivnosti citosolne katalaze (cyt-CAT), mitohondrijalne superoksid dismutaze (Mt-SOD), te mitohondrijalne i citosolne razine ukupnih proteinskih tiola (Mt-TPT, Cyt-TPT). Ukupni antioksidativni kapacitet izražen %-om inhibicije radikala kationa ABTS•+, nije pokazao značajne razlike među skupinama niti u jednoj frakciji. SDS-PAGE-om ustanovljene su razlike među skupinama: u frakciji citosola vjerojatno u razini heat shock protein familije 70, glutation-S-transferaze i kalmodulina, a u frakciji mitohondrija vjerojatno na razini acil-CoA sintetaze (Acsm1), urikaze (Uox), sulfit oksidaze (Suox), tiosulfat sumporove transferaze (Tst) i malat dehidrogenaze (Mdh2). Rezultati ovog istraživanja pokazuju da se unosom epikatehina i kakao proizvoda može utjecati na modulaciju proteina, prvenstveno na razini mitohondrija i citosola jetre. Na razini plazma membrane primarno se događa lipoperoksidacija i promjene na razini sustava citokroma P-450. U odnosu na epikatehin, kakao polifenoli su pokazali jači hepatoprotektivni učinak kao rezultat sinergizma sastava različitih flavonoida.

liver; cocoa polyphenols; CCl4; epicatechin; subcellular fractions; antioxidants

Potpora Sveučilišta u Rijeci br. 13.11.1.2.02