hrvatski

UTJECAJ FLAVONOIDA NA METABOLIČKU AKTIVNOST ENZIMA CYP3A4

Flavonoidi su sekundarni metaboliti viših biljaka. Važni su sastojci ljudske prehrane, posebice voća i povrća te je za brojne flavonoide utvrđen pozitivan utjecaj na ljudsko zdravlje. Poput drugih ksenobiotika, u humanom organizmu, podložni su reakcijama biotransformacije koje uključuju hidrolizu glikozida, demetilaciju metoksi-skupina odnosno metilaciju hidroksilnih skupina, aromatsku hidroksilaciju, glukuronidaciju i sulfokonjugaciju (1). S obzirom na navedeno postoji potencijal interakcija s drugim ksenobioticima, posebice s lijekovima, na razini metaboličkih enzima. Kako su enzimi citrokrom P450 odgovorni za biotransformaciju velikog broja ksenobiotika, cilj ovog rada bio je ispitati inhibitorni učinak odabranih flavonoida na metaboličku aktivnost CYP3A4, uz primjenu odgovarajućih marker supstrata istog enzima. Ispitivanje je provedeno na nizu od deset flavonoida koji su najzastupljenije sastavnice europskih propolisa: apigenin, galangin, kempferol, krizin, kvercetin, luteolin, morin, naringenin, pinocembrin i pinocembrin-7-metileter. Konačna koncentracija flavonoida u inkubacijskim smjesama iznosila je 1 μg/mL, što odgovara maksimalnim koncentracijama flavonoida koje se mogu postići in vivo. Inhibicijski učinak analiziran je na rekombinantnim bakulovirusnim sustavima s hipereksprimiranim CYP3A4. Analiza ostatne aktivnosti flavonoida, nakon 30 min preinkubacije uz NADPH, praćena je dodatkom testosterona - marker supstrata CYP3A4. Za pozitivnu kontrolu inhibicije primjenjen je ketokonazol. Separacija nastalog 6β- hidroksitestosterona postignuta je na C18 koloni uz izokratni protok mobilne faze (metanol-voda, 64:36) na tekućinskom kromatografu (HPLC Agilent 1100) s UV detektorom (λ = 240 nm) (2). Od deset analiziranih flavonoida tri su pokazala statistički značajan potencijal za inhibiciju CYP3A4. U primjenjenim koncentracijama krizin je snizio metaboličku aktivnost CYP3A4 za 83, 5% (p = 0, 010), apigenin za 75, 7% (p = 0, 013) te pinocembrin za 49, 6% (p = 0, 003). Nakon provedenog probiranja potrebno je definirati i okarakterizirati tip inhibicije navedenih flavonoida. 1. D. Čović, M. Bojić, M. Medić-Šarić, Farm. glas. 65 (2009) 693-704. 2. C. D. Sohl, Q. Cheng, F. P. Guengerich, Nat. Protoc. 4 (2009) 1252-1257.

CYP3A4; flavonoidi

nije evidentirano