hrvatski

Fenotipiziranje i kvantificiranje imunosnih stanica miša u bronhoalveolarnom ispirku modela plućne eozinofilije uzrokovane ovalbuminom

Astma je kronična bolest dišnih puteva koja predstavlja ozbiljan zdravstveni problem u mnogim zemljama diljem svijeta. Nakupljanje eozinofilnih granulocita u plućima prihvaćeno je kao pojašnjenje za jedan dio patogenetskih zbivanja te posljedičnih biokemijskih i patohistoloških promjena tijekom astme. Model plućne eozinofilije u miševa uzrokovane ovalbuminom dobro oslikava patofiziološka zbivanja prisutna tijekom astme. Provedena istraživanja opisana u ovom radu bila su usmjerena na razvoj nove citometrijske metode za fenotipiziranje i kvantificiranje udjela eozinofila u bronhoalveolarnom ispirku pluća miševa u modelu plućne eozinofilije uzrokovane ovalbuminom. Primjenom mogućnosti koje pruža analiza obilježenih imunosnih stanica na protočnom citometru i razvrstavanje subpopulacija imunosnih stanica na sorteru stanica, utvrđeno je po prvi puta da se eozinofili miševa mogu pouzdano obilježiti uporabom FITC fluorokroma koji specifično boji eozinofilne granule u kombinaciji s obilježavanjem površinskih biljega CD45 i Gr-1. Osim fenotipizacije eozinofila, u radu je utvrđeno da se istom metodom može fenotipizirati i izbrojati neutrofile, alveolarne monocite/makrofage i ukupne limfocite. Nova metoda opisana u ovom radu ima značajnu prednost u usporedbi sa standarnim imunohistokemijskim ili imunocitokemijskim metodama koje se koriste za identifikaciju i/ili brojanje eozinofila i drugih imunosnih stanica. Pouzdanija je, reproducibilnija i omogućuje znatno brže dobivanja rezultata fenotipizacije i brojanja imunosnih stanica, te potpuno isključuje subjektivnu procjenu istraživača kojoj su podložne standardne metode.

Miš; Ovalbumin; Plućna eozinofilija; Bronhoalveolarni ispirak; Imunosne stanice; Fenotipiziranje; Kvantificiranje

-