hrvatski

Poticanje SOS-odgovora dvolančanim lomom DNA u bakteriji Escherichia coli soja recB1080

SOS-odgovor bakterije E. coli označava indukciju ekspresije preko 40 gena, potaknute oštećenjem DNA. Ovisi o proteinima RecA, LexA i prisutnosti jednolančane (jl) DNA. Signal za SOS-indukciju je nastanak RecA-jl DNA filamenta. RecA-jl DNA filament stvaraju enzimi RecBCD puta, RecF puta, ili hibridne rekombinacijske mašinerije, sa specifičnim enzimskim aktivnostima: helikaznom, egzonukleaznom i aktivnošću nanošenja RecA. U ovom radu istražena je uloga aktivnog nanošenja RecA u SOS-indukciji. Provedena je genetička analiza sojeva sa mutacijama u RecBCD enzimu (recB1080 i recB1067), koje specifično inaktiviraju sposobnost nanošenja RecA. Pomoću operonske fuzije lacZ i sfiA gena uspoređena je jačina SOS-indukcije u sojevima sa mutacijom recB1080 (i recB1067) u različitim genetičkim pozadinama. I-SceI sustavom uvedeni su dvolančani lomovi (dl) u DNA. Pokazano je da je aktivno nanošenje RecA na jl DNA nužno za indukciju SOS-odgovora nakon uvođenja dl loma DNA. Osim toga, pokazano je da RecQ helikaza i RecJ nukleaza nemaju utjecaja na SOS-indukciju nakon uvođenja dl loma u mutantnom soju recB1080 (i recB1067). Uočeno je da mutant recB1080 (i recB1067) ima konstitutivnu SOS- indukciju koja ovisi o aktivnosti RecJ nukleaze, ali ne i o aktivnosti RecFOR enzimskog kompleksa. To upućuje na mogućnost postojanja drugačijeg mehanizma nanošenja RecA pri konstitutivnoj SOS-indukciji.

SOS-odgovor; RecA-jl DNA filament; RecBCD enzim; RecB1080CD enzim; Popravak DNA

nije evidentirano