hrvatski

UTJECAJ IMIDAKLOPRIDA NA PROTEOM ORGANELA KVASCA Saccharomyces cerevisiae W303

U ovom je radu analiziran utjecaj imidakloprida na proteom organela kvasca Saccharomyces cerevisiae W303. Tijekom uzgoja biomase kvasca, u podlogu je dodana određena količina imidakloprida. Pored tretiranog, uzgajan je i kontrolni uzorak kvasca, a oba su uzgajana u identičnim uvjetima. Praćen je utjecaj na plazma membrane, mitohondrije, citosol s mikrosomima te na cijele stanice kvasca. U izoliranim organelama najprije je određena kocentracija proteina metodom po Bradfordu. Proteini su potom razdvojeni primjenom procedure 2D elektroforeze. Gelovi s razdvojenim proteinima obojani su koristeći Mortzovu metodu bojanja srebrom, a obojani proteini obrađeni su programom UVISpot. Praćena je promjena izričaja proteina preko promjene u volumenu. Jedan dio proteina je poslan na analizu u Centar za proteomiku i spektrometriju masa Instituta Ruđer Bošković gdje su proteini analizirani MS MALDI-TOF/TOF tehnikom i identificirani koristeći nrNCBI bazu podataka. Većina identificiranih proteina kod kojih je došlo do promjene izričaja, uključeni su u različite procese metabolizma ugljikohidrata. U uzorcima plazma membrana, mitohondrija i citosola s mikrosomima u koje je dodan imidakloprid, došlo je do povećanja ukupnog broja detektiranih proteina u odnosu na kontrolni uzorak. Do značajne promjene u izričaju došlo je kod: sukcinat-dehidrogenaze (Fe-S podjedinica) i ATP-sintaze u uzorku mitohondrija, gliceraldehid-3-fosfat- dehidrogenaze (izoenzim 3), disulfid-izomeraze i Cu, Zn-superoksid-dismutaze u uzorku citosola s mikrosomima te kod translacijskog elongacijskog faktora 1, gliceraldehid-3- fosfat-dehidrogenaze (izoenzim 3), Cu, Zn- superoksid-dismutaze, enolaze 1 i proteina YNL134C u uzorku cijelih stanica.

kvasac; imidakloprid; proteini; plazma membrane; mitohondriji; citosol; mikrosomi

nije evidentirano