Napredna pretraga

Pregled bibliografske jedinice broj: 71261

Bakterijske lipaze: biokemijska i strukturna karakterizacija


Leščić, Ivana
Bakterijske lipaze: biokemijska i strukturna karakterizacija 2001., magistarski rad, Prirodoslovno-matematički fakultet, Zagreb


Naslov
Bakterijske lipaze: biokemijska i strukturna karakterizacija
(Bacterial lipases: Biochemical and structural characterisation)

Autori
Leščić, Ivana

Vrsta, podvrsta i kategorija rada
Ocjenski radovi, magistarski rad

Fakultet
Prirodoslovno-matematički fakultet

Mjesto
Zagreb

Datum
04.05

Godina
2001

Stranica
97

Mentor
Abramić, Marija; Kojić-Prodić, Biserka

Ključne riječi
Lipaza; Streptomyces rimosus; Svojstva; Supstratna selektivnost; Pseudomonas cepacia; Analog prijelaznog stanja (inhibitor); Kristalna struktura
(Lipase; Streptomyces rimosus; Properties; Substrate selectivity; Pseudomonas cepacia; Transition state analog (inhibitor); Crystal structure)

Sažetak
Iz filtrata kulture bakterije Streptomyces rimosus pročišćena je lipaza uporabom kromatografije na stupcu CM-celuloze i Phenyl-Sepharose CL-4B, te gel-filtracijom na stupcu Sephadexa G-75 Superfine. Relativna molekulska masa lipaze određena je gel-filtracijom na stupcu istog punila i iznosi ~27800. Enzim je stabilan do 50°C, a optimalna temperatura za hidrolizu p-nitrofenil-palmitata ovom lipazom je 55°C. Međupovršinska aktivacija lipaze pokazana je uz p-nitrofenil-butirat kao supstrat. Optimalni supstrati (triacilgliceroli i esteri p-nitrofenola) ovog enzima imaju srednju duljinu acilnog lanca (C8-C12). Aktivnost lipaze je povećana uvođenjem dvostrukih veza u acilni lanac supstrata. Prirodna ulja i Tween-deterdženti također su dobri supstrati lipaze. U triacilglicerolima ovaj enzim cijepa i primarne i sekundarne esterske veze. Priređeni su kristali kompleksa lipaze bakterije Pseudomonas cepacia i inhibitora, klorida (RP,SP)-metil-O-((2R)-1-fenoksibut-2-il)fosfonatne kiseline, metodom difuzije pare u visećoj kapi. Kompleksu je određena kristalna struktura metodama rendgenske difrakcije. Strukture kompleksa i nativnog proteina su izomorfne; obje makromolekule kristaliziraju u prostornoj grupi C2. Obje se strukture odlikuju istim trodimenzionalnim rasporedom koji je karakterističan za α/β-hidrolaze. Aktivno mjesto lipaze karakteriziraju aminokiseline Ser87, His286 i Asp264, ključne za katalitički mehanizam. Aktivno mjesto u oba proteina nije zaštićeno, pa govorimo o “otvorenom” obliku lipaze. Inhibitor je u kompleksu s lipazom kovalentno vezan na aktivni serin.

Izvorni jezik
Hrvatski

Znanstvena područja
Kemija



POVEZANOST RADA


Projekt / tema
00980608
00980705

Ustanove
Institut "Ruđer Bošković", Zagreb

Autor s matičnim brojem:
Ivana Leščić Ašler, (231256)