hrvatski

Određivanje kvalitete dna degradiranih uzoraka primjenom QRT-PCR tehnike

Uvod- Uzorci DNA izloženi različitim vremenskim čimbenicima, sunčevom svijetlu, temperaturi, vlazi, dovode do degradacije DNA i poteškoća pri analliziranju i utvrđivanju DNA profila. Cilj- Odrediti količinu i kvalitetu DNA iz degradiranih uzoraka izuzetih sa krvnih mrlja na različitim vrstama podloge, utjecaj sunčevog svjetla na količinu DNA, utjecaj kemijskih agensa iz pojedinih vrsta papira na količinu DNA Metode- Ukupna stanična DNA iz uzoraka krvi izdvojena je pomoću komercijalnog Chelex Kita. Uzorci DNA su kvantificirani na uređaju ABI PRISM® 7000 SDS uz pomoć komercijalnnog Quantifiler™ Human DNA Identification Kita. Rezultati- U 5 uzoraka prikupljenih sa 7 različitih podloga DNA nije detektirana , dok je u svim ostalim uzorcima DNA uspješno kvantificirana. Koncentracija DNA se smanjivala kako je vrijeme izlaganja sunčevom svjetlu raslo. Najveća koncentracija DNA izuzete sa svih podloga bila je tokom prvih 14 dana ispitivanja. DNA nije detektirana kod uzoraka izuzetih sa zemlje dok su minimalne količine detektirane kod uzoraka izuzetih sa bijelog papira. To je vjerojatno posljedica prisustva inhibitora (humusna kiselina u zemlji) te različitih vrsta kemijskih agensa koji se koriste u proizvodnji papira. Kod svih uzoraka izuzetih sa 4 različite vrste papira uspješno je određena koncentracija DNA koja se razlikovala ovisno o vrsti papira i njegovim svojstvima. Zaključak- DNA je moguće izolirati iz degradiranih uzoraka krvi te kvantificirati primjenom QRT-PCR metode. Sunčeva svjetlost oštećuje DNA iz uzoraka krvi i doprinosi njenoj degradaciji u ovisnosti o vremenu izlaganja i vrsti podloge. Visoko osjetljiva metoda QRT-PCR kvantifikacije potrebna je da bi se optimalno iskoristila DNA iz bioloških uzoraka koji sadrže minimalne količine DNA.

degradirana DNA ; sunčeva svjetlost ; uzorak krvi ; različite podloge ; QRT-PCR kvantifikacija DNA

nije evidentirano