hrvatski

Metode izolacije DNA iz uzoraka ljudskih kostiju različite starosti

S ciljem vrednovanja organske i anorganske izolacije DNA iz kostiju iz uzoraka svježih i starih kostiju, 3 i 5 godina, navedenim postupcima je izolirana DNA. Organska izolacija je provedena smjesom fenol/kloroform/izoamilni alkohol nakon čega je izolirana DNA koncentrirana na Centricon 100 mikrokoncentratoru. Anorganska izolacija je provedena zasićenim amonij-acetatom, a izolirana DNA je precipitirana hladnim apsolutnim alkoholom. Metodom spektrofotometrije određene je količina izolirane DNA. Semikvantitativna analiza je načinjena na gelu agaroze na kojem je provjerena i kvaliteta izolirane DNA. Uzorci DNA umnoženi su za nekoliko STR lokusa, a rezultati su provjereni na kapilarnoj elektroforezi. Uočena je prednost organske nad anorganskom metodom i za svježe i za stare kosti. Za svježe kosti bedrena kost se pokazala pogodnijom od rebrene kosti za izolaciju DNA, i organskom i anorganskom metodom. Za izolaciju DNA organskom metodom iz starih kostiju, zub je pogodniji od bedrene kosti, a pri anorganskoj izolaciji je bilo obrnuto. Zbog iznimne važnosti analize DNA u svrhu identifikacije kako živih, tako i umrlih osoba, organska metoda izolacije DNA iz kostiju, osobito bedrenih kostiju i zubiju, se nastoji i dalje usavršavati kakao bi se povećala količina i kvalitete tako dobivene DNA, a time i vjerodostojnost njezine analize.

DNA; izolacija; ljudske kosti

nije evidentirano