engleski

CTX-M beta-lactamases in Enterobacter cloacae isolates from Southern Croatia

UVOD: U enterobakterija koje posjeduju inducibilnu AmpC kromosomalnu β-laktamazu poput Enterobacter cloacae teško se otkivaju β-laktamaza proširenog spektra /ESBL) molekularne klase A inhibirane klavulanatom. AmpC β-laktamaza inducirana je klavulanskom kiselinom i najčešće hidrolizira indikator cefalosporin koji se koristi u metodi sinergije dvostrukog diska (DDST). Stoga se često preporuča uporaba inhibitora AmpC β-laktamaze pri izvođenju DDST-a, poput kloksacilina. U 2009. godini u bolničkih izolata Kliničkog bolničkog centra Split i Opće bolnice Dubrovnik opažen je porast učestalosti izolata E. cloacae otpornih na cefalosporine 3. generacije. Sa ciljem utvrđivanja mehanizma otpornosti na oksiiminocefalosporine, za 30 izolata E. cloacae urađena je molekularna detekcija i karakterizacija β-laktamaza proširenog spektra (ESBL). METODE: Svim izolatima urađen je DDST na kloksacilinskom agaru. Mikrodilucijom u bujonu određena je osjetljivost na antibiotike i interpretirana po kriterijima CLSI-a. Prijenos cefotaksimske rezistencije određen je metodom konjugacije koristeći E. coli A15R- soj. Detekcija blaTEM, blaSHV i blaCTX-M gena urađena je uz pomoć specifičnih početnica lančanom reakcijom polimeraze. Multiplex-PCR korišten je u određivanju grupe CTX-M β-laktamaze. Plazmidna DNK ekstrahirana je komercijalnim kitom. REZULTATI: DDST na kloksacilinskom agaru bio je pozitivan svim izolatima. Svi izolati bili su osjetljivi na kombinaciju cefotaksima s klavulanatom, piperacilina s tazobaktamom i na karbapeneme. Svi izolati prenjeli su cefotaksimsku rezistenciju metodom konjugacije s frekvencijom prijenosa od 1 do 5x106. Svi izolati posjedovali su CTX-M β-laktamazu grupe 9. blaCTX-M gen nalazio se na prenosivom plazmidu veličine oko 150 kb. ZAKLJUČAK: Iako CLSI i EUCAST standardi ne ukazuju na načine dokazivanja β-laktamaza proširenog spektra u izolata koji posjeduju AmpC β-laktamazu preporučljivo je uložiti dodatan napor u dokazivanju ovih enzima budući da može doći do prijenosa rezistencije plazmidima i na druge bakterijske vrste i teško kontroliranog širenja otpornih izolata unutar bolničkog okruženja.

Enterobacter cloacae; CTX-M beta-lactamases; resistance

nije evidentirano