Napredna pretraga

Pregled bibliografske jedinice broj: 678569

Signalni putovi stanične smrti kod mišjih embrionalnih fibroblasta nakon UVB zračenja


Skelin, Josipa
Signalni putovi stanične smrti kod mišjih embrionalnih fibroblasta nakon UVB zračenja 2014., diplomski rad, diplomski, Prirodoslovno-matematički fakultet, Zagreb


Naslov
Signalni putovi stanične smrti kod mišjih embrionalnih fibroblasta nakon UVB zračenja
(Cell death signaling pathways after UVB irradiation in mouse embryonic fibroblasts)

Autori
Skelin, Josipa

Vrsta, podvrsta i kategorija rada
Ocjenski radovi, diplomski rad, diplomski

Fakultet
Prirodoslovno-matematički fakultet

Mjesto
Zagreb

Datum
22.01

Godina
2014

Stranica
55

Mentor
Marijanović, Inga

Neposredni voditelj
Antunović, Maja

Ključne riječi
FADD; UVB

Sažetak
Fasu pridruženi protein s domenom smrti je ključni adapterski protein koji sudjeluje u nizu signalnih procesa u stanici, uključujući i vanjski signalni put apoptoze i signalni put nekroptoze. UVB zračenje može inducirati staničnu smrt putem izazivanja oštećenja DNA, direktno aktivirajući površinske receptore na stanici te putem formacije reaktivnih kisikovih vrsta. U ovom radu ispitan je utjecaj FADD proteina na odabir signalnog puta stanične smrti koja nastupa uslijed UVB zračenja s 300J/m2. Stanice divljeg tipa te stanice kojima nedostaje FADD protein su 24 sata prije zračenja tretirane pankaspaznim inhibitorom zVAD-fmk, koji inhibira proces apoptoze, inhibitorom RIP1 kinaze necrostatin-1, koji inhibira proces nekroptoze, te s oba tretmana istovremeno. Protočnom citometrijom utvrđene su populacije živih stanica, stanica u ranoj apoptozi te stanica u kasnoj apoptozi/nekrozi. Elektoforezom DNA detektirana je apoptoza. Komercijalnim kitovima detektirane su aktivnosti kaspaza-3, -8 i -9. Western imunodetekcijom proteina detektirani su proteini PARP-1, PARP-2 i protein p53 fosforiliran na serinu15. Lančanom reakcijom polimeraze u stvarnom vremenu utvrđena je aktivnost gena BAX i BCL-2. Bojanjem autofagosoma akridin oranžom detektirana je autofagija. Rezultati pokazuju kako mišji embrionalni fibroblasti divljeg tipa uslijed zračenja umiru vanjskim i unutarnjim putem apoptoze i nekroptozom. Moguća je i prisutnost alternativnog puta stanične smrti koji nastupa prilikom inhibicije nekroptoze. FADD-/- mišji embrionalni fibroblasti pokazuju smanjeno preživljenje uslijed zračenja. Rezultati dobiveni za ovaj tip stanica ukazuju na prisutnost oba tipa apoptoze i nekroptoze, no ne kao dominantnih tipova stanične smrti. Također, detektirana je autofagija u svim promatranim uzorcima, no nejasno je javlja li se ona kao zaseban tip stanične smrti ili kao izvršni mehanizam nekroptoze.

Izvorni jezik
Hrvatski

Znanstvena područja
Biologija



POVEZANOST RADA


Projekt / tema
119-0000000-1256 - Učinak ekspresije FADD-a na karcinogenezu izazvanu UV zračenjem (Inga Marijanović, )

Ustanove
Prirodoslovno-matematički fakultet, Zagreb