hrvatski

Evaluacija real-time PCR metode za izravnu identifikaciju mikobakterija u kliničkim uzorcima

Uvod: Učinkovitost PCR metoda za direktnu identifikaciju mikobakterija postaje vrlo zanimljivo područje. Novija istraživanja utvrdila su smanjenu uspješnost identifikacije kada se PCR metoda primjenjuje na uzorcima iskašljaja s malim brojem prisutnih acidorezistentnih bacila (1+) u mikroskopskom preparatu. Cilj ovog istraživanja bio je utvrditi da li bi PCR bilo opravdano raditi samo na mikroskopski pozitivnim kliničkim uzorcima visokog pozitiviteta (2+ i 3+). Metode: Istraživanje je provedeno u Kliničkom bolničkom centru Zagreb. Real-time PCR metoda koja razlikuje Mycobacterium tuberculosis complex (MTBC) i ostale Mycobacterium spp. napravljena je na mikroskopski pozitivnim kliničkim uzorcima. Dobiveni rezultati evaluirani su u odnosu na intenzitet pozitiviteta mikroskopskog preparata (1+, 2+ i 3+). Osim molekularnih korištene su i konvencionalne metode (bojanje aureminom, te kultivacija mikobakterija na krutim i tekućim hranjivim podlogama). Results: Od ukupno pedeset dva mikroskopski pozitivna klinička uzorka (33 iskašljaja, 12 bronhoalveolarnih lavata, 6 bronhalnih aspirata i 1 pleuralni izljev), u 51 uzorku je u kulturi porastao MTBC, a u 1 netuberkulozna mikobakterija (NTM). PCR je imao 100%-tnu uspješnost identifikacije kod uzoraka s mikroskopskim pozitivitetom 2+ i 3+, dok je identifikacija bila uspješna kod svega 14 od 27 (52%) uzoraka s pozitivitetom 1+. Zaključak: Točna identifikacija mikobakterija u kliničkim uzorcima bila je manje uspješna kod uzoraka s niskim mikroskopskim pozitivitetom. Naše istraživanje potvrdilo je zapažanja da uspješnost PCR metode ovisi o količini mikobakterija prisutnih u kliničkom uzorku. Stoga PCR nije dovoljno pouzdan da bi se njime isključila dijagnoza tuberkuloze kod paucibacilarne plućne tuberkuloze, ali ga svakako treba koristiti kod kliničkih uzoraka s visokim pozitivitetom zbog brzog utvrđivanja dijagnoze. Potrebna su daljnja istraživanja kako bi se potvrdilo da za optimalnu učinkovitost (odnos cijenakorist) PCR metode treba raditi samo na kliničkim uzorcima visokog pozitiviteta (2+ i 3+).

real-time PCR; mikobakterija

nije evidentirano