hrvatski

Fosforilirane molekule signalnih puteva PI3K/Akt i MAPK u akutnim mijeloičnim leukemijama

Kaskade aktiviranih signalnih puteva reguliraju brojne stanične procese kao što su proliferacija, diferencijacija, preživljenje i apoptoza. Poremećaj i konstitutivna aktivacija fosfoinozitol 3-kinaze/Akt (PI3K/Akt) i mitogenima aktivirane protein kinaze (MAPK) česta je pojava u tumorogenezi i leukemogenezi. Aktivacija signalnih puteva podrazumijeva fosforilaciju točno određenih aminokiselina molekula koje su dijelovi tih puteva. Cilj istraživanja bio je analizirati fosforilacijski status signalnih puteva u blastima ljudskih akutnih mijeloičnih leukemija (AML) s pomoću protočne citometrije. Membransko obilježavanje stanica na biljege CD45 i CD34 korišteno je u svrhu definiranja blasta u uzorcima AML. Za detekciju fosforiliranih molekula signalnih puteva stanice su najprije fiksirane i permeabilizirane, nakon čega su obilježene monoklonskim protutijelima anti-Akt (pT308), anti- ERK1/2 (pT202/pY204) i anti-p38 MAPK (pT180/pY182). Analiza fosforilacijskog statusa utvrđena je prema izotipskoj kontroli s pomoći Kolmogorov-Smirnovljevog statističkog testa. Pozitivnima su se smatrale D-vrijednosti veće od 0.2 (D>0.2). Fosforilirana molekula Akt nađena je u 30/48 (62.5%), molekula ERK1/2 u 25/48 (52.1%), a molekula p38 u 18/48 (37.5%) ispitivanih bolesnika s AML. Pri tome je nađena statisitički značajna pozitivna korelacija između fosforilacije Akt i p38MAPK (p=0.0001, r=0.55). Drugim riječima, 16/18 (88.8%) AML s fosforiliranom p38 MAPK bilo je pozitivno na fosforiliranu molekulu Akt. Hi- kvadrat test pokazao je statistički značajno veću frekvenciju fosforilirane molekule Akt u p38 pozitivnim uzorcima (p=0.009). Prema statusu fosforilacije može se tvrditi da su signalni putevi PI3K/Akt i MAPK aktivirani u značajnog broja bolesnika s AML. Povezanost p38 MAPK i Akt aktivacije govori u prilog mogućoj interakciji i suradnji među dvama signalnim putevima u ovom tipu leukemija. Istraživanja na većem broju bolesnika potrebna su za potvrdu ove teze, kao i za dodatnu karakterizaciju tih oblika AML u odnosu na poznate kliničko- laboratorijske pokazatelje za klasifikaciju i prognozu AML.

fosforilacija; signalni putevi; akutna mijeloična leukemija

nije evidentirano