hrvatski

Osjetljivost Giemsa i DAPI bojanja u mikronukleus metodi za procjenu genotoksičnog oštećenja somatskih stanica ultrazvukom

Primjena ultrazvuka u medicinskoj dijagnostici i terapeutici svakodnevno je u porastu. Literaturni podaci o citogenetskom učinku profesionalnog izlaganja ultrazvuku su malobrojni. Istraživanje genotoksičnog učinka ultrazvuka provedeno je na dvije skupine ispitanika: skupini ispitanika profesionalno izloženih pulsirajućim valovima ultrazvuka (Color Doppler), frekvencije 2MHz - 7, 5MHz (max. intenzitet 187 W/cm2) i kontrolnoj skupini. Za procjenu oštećenja genoma somatskih stanica korištena je mikronukleus metoda na 72-satnoj kulturi limfocita periferne krvi (Fenech i Morley, 1985). Preparati su bojani Giemsa bojom i fluorescencijskom bojom DAPI (4", 6-diamidino-2-fenilindol dihidroklorid) prema Schweizer (1981). U skupini ispitanika profesionalno izloženih ultrazvuku utvrđena su odstupanja u broju i distribuciji mikronukleusa koja su pokazatelj genotoksičnog učinka ultrazvuka (Doppler). Obje tehnike bojanja dale su dobre rezultate u detekciji mikronukleusa, ali je bojanje DAPI bojom osjetljivija tehnika. Naime, zbog specifičnog afiniteta DAPI boje prema centromernom heterokromatinu, ona omogućuje razlikovanje mikronukleusa koji sadrže dijelove kromosoma ili čitave kromosome s jednim ili više centromera od onih koji sadrže samo acentrične fragmente. The ultrasound application in medicine for diagnostic and therapeutic purposes constantly increases. Up to date, little information about cytogenetic effects of occupational exposure to the ultrasound is available. The presumptive genotoxic effect of ultrasound was studied on two groups of subjects: the group of subjects occupationally exposed to pulsed-wave color Doppler in frequencies 2 MHz- 7.5 MHz (max. intensity 187 W/cm2) and the control group. The damage of somatic cells genome was evaluated by the micronucleus assay in 72h peripheral blood lymphocyte culture (Fenech & Morley, 1985). Micronuclei were stained by Giemsa dye and fluorescent dye DAPI (4", 6- diamidino-2-phenylindol-dihydrochloride) according to Schweizer (1981). All occupationally exposed subjects showed an increase in number and distribution of micronuclei, as compared to the control. For the detection of micronuclei both staining techniques were effective, but DAPI staining technique was more sensitive. Namely, because of DAPI"s preferential binding in regions of centromeric heterochromatin, this staining technique allowed us the distinguish micronuclei which originate from centric chromosomal fragments or entire chromosomes from those which originate only from acentric chromosomal fragments.

ultrazvuk; mikronukleus test; Giemsa bojanje; DAPI bojanje; somatske stanice

nije evidentirano