hrvatski

Fitoekstrakcija kadmija pomoću rekombinantne DNA tehnologije kod kukuruza

Teški metali spadaju u grupu najznačajnijih zagađivača u okolišu. Kadmij kao teški metal predstavlja problem u okolišu zbog njegove toksičnosti za biljke, životinje i ljude. Tehnike koje se koriste za remedijaciju su obično skupe i često negativno utječu na plodnost tla, što nije slučaj sa fitoremedijacijom. Da bi se neki teški metal uklonio iz tla potrebno je imati biljku koja će akumulirati taj metal u svojim tkivima. Takav proces naziva se fitoekstrakcija. Hiperakumulacija u tkivima je moguća, ali ograničavajući faktor je količina biomase. Kod kukuruza (Zea mays L.) je pronađen gen odgovoran za nakupljanje kadmija u listu – ask2 koji kodira protein aspartat kinaza2. Pošto se radi o jednom genu velik je potencijal za manipilaciju tim genom u svrhu povećanja (ili smanjenja) akumulacije kadmija u biljci. Gen dobiven iz Arizona Genomics instituta iz cDNA biblioteke ZM_BFc003612C. Zbog lakše kasnije imunodetekcije i izolacije proteina iz biljke lančanom reakcijom polimerazom (PCR) dodani su HA i FLAG biljezi na 3´ kraj gena. Ask2 gen s HA i FLAG biljezima je kloniran u TOPO vektor kojim su transformirane kemijski kompetentne stanice E.coli. Selekcija transformanata je obavljena na pločama s kanamicinom, a potvrda ugradnje gena je izvršena elektroforezom i PCR reakcijom. Nakon potvrde ugradnje ask2 gena u TOPO vektor gen je LR reakcijom rekombinacije ugrađen u Gateway vektor prilagođen za transformaciju monokotiledona (pANIC) te su njima transformirane DH5α kemijski kompetentne stanice E.coli. Zbog velike količine biomase kukuruza i njegove široke rasprostranjenosti ideja fitoremedijacije teških metala pomoću kukuruza se čini vrlo privlačnom.

kadmij; fotoremedijacija; Gateway tehnologija

nije evidentirano