hrvatski

Dokazivanje NPM-ALK transkripta kod non-Hodgkin limfoma

Anaplastični limfom velikih stanica (ALCL) predstavlja oko 25% svih non-Hodgkin limfoma (NHL) u djece i adolescenata i oko 5% u odrasloj skupini NHL bolesnika. Po REAL klasifikaciji to su tumori T ili 0 fenotipa, koji pokazuju ekspresiju CD30 antigena. Maligne stanice ovog limfoma prevenstveno infiltriraju tkivo limfnih čvorova, a mogu se naći i u mekim tkivima, gastrointestinalnom traktu i koštanoj srži. U gotovo trećini slučajeva ALCL-a nađen je kromosomski poremećaj nastao balansiranom translokacijom (2 ; 5)(p23 ; q35). Gen 5q35 NPM (nukleofosmin) uključen je u regulaciju staničnog ciklusa, a gen 2p23 ALK je onkogen koji se tek aktivacijom eksprimira u protein s aktivnošću tirozin-kinaze. Translokacijom ALK gen prelazi s drugog na peti kromosom i veže se na NPM gen tvoreći NPM-ALK kimerični gen. NPM-ALK gen kodira hibridni protein od 80 kD koji pokazuje aktivnost tirozin-kinaze. Cilj rada bio je utvrditi da li postoji translokacija (2 ; 5) u skupini od 27 bolesnika dobne skupine od 22-79 godina, kojima je morfološki i imunohistokemijski dijagnosticiran non-Hodgkin limfom. 24 bolesnika su morfološki definirani kao ALCL, 2 bolesnika kao velikostanični NHL i jedan kao imunoblastični limfom. Iz ekstrahiranih limfnih čvorova izolirana je RNK, reverznom transkripcijom prevedena u cDNK, i pomoću PCR reakcije u dva koraka (nested PCR) umnožavani su kontrolni geni ß-aktin, intracelularni dio ALK gena i kimerični gen NPM-ALK. ß-aktinom smo dokazali zadovoljavajuću kvalitetu izolirane RNK i transkribirane cDNK svih uzoraka, a parcijalnim umnožavanjem ALK gena dokazali smo prisustvo ALK gena u svim ispitivanim uzorcima. Postojanje NPM-ALK transkripta dokazali smo u jednom uzorku ALCL i kod dva uzorka velikostaničnog NHL, što čini 11 % ispitivanih uzoraka non-Hodgkin limfoma.

ALCL; NPM-ALK; molekularna dijagnostika

nije evidentirano