hrvatski

SINKRONIZACIJA I POVEĆANJE MITOTSKE AKTIVNOSTI STANICA DUHANA (Nicotiana tabacum L.) U SUSPENZIJI

Stanična linija duhana Nicotiana tabacum L. kultivar Bright Yellow No.2 (BY-2) jedna je od najčešće primjenjivanih suspenzija stanica u biljnoj biologiji. Sinkroniziranje stanične kulture omogućava neposredno istraživanje staničnoga ciklusa. Svrha ovog istraživanja bila je sinkronizacija rasta stanica duhana BY-2 u tekućoj podlozi pažljivim odabirom: početnog razrjeđenja, stupnja diferencijacije te perioda supkultivacije. U staničnoj kulturi, ostavljenoj dva tjedna bez presađivanja, stanice su postale diferencirane i zrele te se ponovnom supkultivacijom u svježu podlogu počinju dijeliti, a treći dan nakon presađivanja postižu najveći mitotski indeks. Vizualizacijom mikrotubula moguće je odrediti pojedine faze staničnog ciklusa, a u ovom istraživanju se to željelo postići obilježavanjem mikrotubula dvostrukim zelenim fluorescentnim proteinom. Konačan cilj sinkronizacije i povećanja udjela stanica BY-2 u mitozi bio je usmjeren na praćenje unutarstanične lokalizacije do sada nepoznatog proteina kukuruza (ZmMAB1). Obilježavanjem proteina kukuruza ZmMAB1 crvenim fluorescentnim proteinom uočava se njegova moguća kolokalizacija s mikrotubulima tijekom diobe.

Sinkronizacija; mitotski indeks; stanice Bright Yellow No.2; stanična dioba

nije evidentirano