Enzimatska karakterizacija piruvat-kinaze bakterije Bacillus subtilis (CROSBI ID 375628)
Ocjenski rad | diplomski rad
Podaci o odgovornosti
Kovač, Kristina
Franjević, Damjan
Mijaković, Ivan
hrvatski
Enzimatska karakterizacija piruvat-kinaze bakterije Bacillus subtilis
Piruvat-kinaza je ključni enzim glikolize i metabolizma ugljika. Katalizira završni korak glikolitičkog puta, prenoseći fosforilnu skupinu fosfoenolpiruvata (PEP) na ADP, stvarajući ATP i piruvat. Reakcija je ireverzibilna, te predstavlja važno regulatorno mjesto u glikolizi. U ovom istraživanju piruvat-kinaza je izolirana iz aerobne Gram-pozitivne bakterije Bacillus subtillis, te pročišćena metodom afinitetne kromatografije do homogenosti. Enzimska rekacija se odvijala pri pH 7.5, uz prisustvo supstrata (PEP i ADP), te iona - K+ i Mg2+ koji s ADP-om tvori Mg2+-ADP kompleks, koji djeluje kao pravi substrat enzimu. Cilj istraživanja je bio utvrditi kinetičke parametre – Km i Vm piruvat-kinaze. Eksperimentalni podaci dobiveni spektrofotometrijskom metodom prikazani su Michealis-Menten modelom enzimske kinetike, te su pomoću linearizacijskih prikaza izračunate vrijednosti Km=1, 2138 mM, Vm=227, 062 µmol NADH/min/µg proteina za ADP, te Km=0, 9081 mM, Vm=97, 1125 µmol NADH/min/µg proteina za PEP. Navedni su rezultati dobiveni Hanes-Woolf linearizacijskim prikazom.
piruvat-kinaza; enzimska karakterizacija; Bacillus subtilis
nije evidentirano
engleski
Enzymatic characterization of Bacillus subtilis pyruvate kinase
nije evidentirano
pyruvate kinase; enzymatic characterization; Bacillus subtilis
nije evidentirano
Podaci o izdanju
40
23.11.2012.
obranjeno
Podaci o ustanovi koja je dodijelila akademski stupanj
Prirodoslovno-matematički fakultet, Zagreb
Zagreb