hrvatski

Biološki učinci novih monometinskih cijaninskih derivata

Monomerne cijaninske boje oksazol žuta i tiazol narančasta tijekom posljednjih 20 godina se zbog sposobnosti vezanja za nukleinske kiseline (NK) i svojstva fluorescencije koja se pojačava uslijed interakcije s NK, primjenjuju kao osnova za sintezu novih spojeva. Budući je interakcija s NK odnosno DNK/RNK jedan od principa djelovanja protutumorskih lijekova, ispitano je citotoksično i protutumorsko djelovanje četrnaest novosintetiziranih monometinskih cijaninskih derivata (MCD). Mehanizam interakcije s NK analiziranih MCD-a je vezanje za mali utor DNK, osim za MCD 8 koji se interkalira u NK. Metodologija istraživanja obuhvatila je primjenu MTT testa za procjenu citotoksičnosti na normalnim i tumorskim staničnim linijama, protočnu citometriju za analizu staničnog ciklusa, fluorescentnu mikroskopiju za lokalizaciju spojeva unutar stanice i gel elektroforezu za vizualizaciju nukleinskih kiselina in vitro. In vivo istraživanje toksičnosti i protutumorskog djelovanja procijenjeno je na osnovu hematoloških i biokemijskih parametara, histomorfološke analize organa i veličine izraslog tumora nastalog implantacijom tumorskih mišjih stanica na mišjem modelu. Prikupljeni podaci analizirani su primjenom Student t-testa i višefaktorijalnom analizom varijance (MANOVA) uz Fisherov LSD test primjenom STATISTICA 8.0 programa. Među analiziranim monometinskim cijaninskim derivatima MCD 4 (IC50 = 1, 04 µM) i MCD 8 (IC50 = 5, 80 µM) pokazali su najbolju citotoksičnost na modelu čvrstih tumora uz poštedni učinak na normalne stanične linije (IC50 > 50 µM). MCD 4 zaustavlja stanični ciklus HeLa stanica u G2/M fazi, dok MCD 8 uzrokuje zastoji u S i G2/M fazi. Fluorescentnom mikroskopijom potvrđena je fluorescencijska sposobnost i lokalizacija MCD 4, 8 i 14 unutar stanice. Karakteristični zeleni fluorescentni signal raspršen po cijeloj stanici zajedničko je obilježje svih analiziranih MCD-a. Dodatno, MCD 8 omogućuje dobru vizualizaciju NK na gelu. In vivo utvrđeno je jače toksično djelovanje MCD 4 na ženke u odnosu na mužjake u kroničnoj izloženosti, za razliku od MCD 8 koji pokazuje manju toksičnost bez obzira na spol i vrijeme izloženosti spoju. MCD 4 i 8 ne zaustavljaju rast implantiranog mišjeg karcinoma dojke. Istraživanje je rezultiralo probirom dvije nove fluorescentne monometinske cijaninske boje (MCD 4 i 8) niske toksičnosti sa velikim potencijalom primjene u području molekularne biologije za obilježavanja živih stanica i praćenje bioloških molekula.

monometinski cijaninski derivati ; citotoksičnost ; fluorescencija ; vizualizacija ; protutumorski učinak

nije evidentirano