hrvatski

Stanična kultura humanih mioblasta - model za istraživanje metaboličkih miopatija

Cilj: Manjak S-adenozilhomocistein hidrolaze (SAHH ; EC 1.1.3.3.) dokazan je dosad u devet bolesnika. Iako je klinička slika varijabilna, svi bolesnici koji boluju od ove multisistemske bolesti od rođenja imaju miopatiju i značajno povišenu serumsku aktivnost enzima kreatin kinaze. Liječenje ima povoljan učinak na brojne kliničke i biokemijske parametre, ali u mišićima izostaje repozitivan učinak ili je on mnogo manji. Budući da je nejasno zašto je upravo mišićno tkivo najviše pogođeno kod bolesnika s manjkom SAHH, od iznimne je važnosti uspostava kulture mioblasta kao modela za daljnje proučavanje patogeneze ove bolesti na razini metabolita, proteina i gena. Metode: Mioblasti su izolirani iz bioptata skeletnog mišića veličine do 5 mm3 uz pomoć enzimatske digestije. Stanice su uzgajane u sterilnim uvjetima u mediju s faktorima rasta. Nakon što su postigli konfluenciju od 70-80%, mioblasti su tripsinizacijom podijeljeni u subkulture. Rezultati: Uspostavljena je kultura humanih mioblasta. Korištenjem magnetskog staničnog separatora mioblasti su odvojeni od fibroblasta i kao takvi pohranjeni u tekući dušik. Čistoća pročišćenih mioblasta potvrđena je metodom protočne citometrije s markerima CD 56+ i CD 45-. Pročišćeni mioblasti diferencirani su u miotube. Zaključci: Prikazan je optimizirani postupak uzgoja i pohrane pročišćenih humanih mioblasta iz vrlo male količine mišićnog tkiva. Ovakav biološki materijal omogućuje daljnje proučavanje manjka SAHH, kao i drugih miopatija.

stanična kultura; mioblasti; metabolička miopatija

nije evidentirano