hrvatski

PRAĆENJE AKTIVNOSTI BUTIRILKOLINESTERAZE SERS SPEKTROSKOPIJOM

Spektroskopija površinski pojačanog Ramanovog raspršenja (SERS) primijenjena je pri istraživanju hidrolize butiriltiokolina (BTCh) butirilkolinesterazom (BChE). Istraživanja su provedena u koloidnim suspenzijama srebra pripravljenim redukcijom srebrova nitrata s trinatrijevim citratom te hidroksilamin hidrokloridom. Citratni i kloridni anioni na površini metalnih nanočestica osim što stabiliziraju koloide, omogućavaju adsorpciju pozitivno nabijenog supstrata koja je uvjet za pojačanje Ramanovog raspršenja. Produkti nastali hidrolizom butiriltiokolina ne adsorbiraju se na površinu metala te Ramanovo raspršenje slabi. Mjerni uzorci pripravljani su na tri načina koji su se razlikovali prema redoslijedu dodavanja pojedinih sastojaka. Analizom snimljenih spektara utvrđeno je da molekule supstrata adsorbirane na površinu metala ometaju hidrolizu, dok je miješnjem enzima s nanočesticama srebra s kloridnim ionima na površini enzimska reakcija sporija nego u slučaju nanočestica s citratnim slojem. Tijekom vremena intenzitet Ramanovog raspršenja se smanjuje ne samo uslijed enzimske aktivnosti, već i agregiranja nanočestica. Smanjenje SERS intenziteta butiriltiokolina (1, 0x10-2 mol dm-3) s povećanjem koncentracije butirilkolinesteraze u području 2, 0x10 - 9-4, 0x10-8 mol dm-3 može se opisati eksponencijalnom funkcijom. Nisu opažene značajnije razlike aktivnosti enzima u dva istraživana koloida.

površinski pojačano Ramanovo raspršenje; butirilkolinesteraza; butiriltiokolin; nanočestice srebra; enzimska aktivnost

nije evidentirano