Napredna pretraga

Pregled bibliografske jedinice broj: 587909

Ispitivanje vijabilnosti legionela izloženih sušenju


Pašić, Edina
Ispitivanje vijabilnosti legionela izloženih sušenju 2012., diplomski rad, diplomski, Medicinski fakultet, Rijeka


Naslov
Ispitivanje vijabilnosti legionela izloženih sušenju
(Testing the viability of Legionella exposed to drying)

Autori
Pašić, Edina

Vrsta, podvrsta i kategorija rada
Ocjenski radovi, diplomski rad, diplomski

Fakultet
Medicinski fakultet

Mjesto
Rijeka

Datum
12.7

Godina
2012

Stranica
47

Mentor
Gobin, Ivana

Ključne riječi
Suhi uvjeti; Legionella; Acanthamoeba castellani; A549 stanice; viability
(Dry conditions; Legionella; Achantamoeba castellanii; A549 cells; viability)

Sažetak
Legionele su fakultativni unutarstanični patogeni koji parazitiraju unutar slobodno-živućih ameba i zbog povoljnih uvjeta, razmnožavaju u velikom broju. Prilagođene su na život u vodenom okolišu, no sposobne su živjeti i u tlu (Legionella longbeachae). Upravo sposobnost unutarstaničnog razmnožavanja u alveolarnim makrofazima, ključna je za pojavu legionarske bolesti najčešće uzrokovane vrstom Legionella pneumophila. Uz amebe i alveolarne makrofage, spomenuti unutarstanični patogeni se razmnožavaju i unutar različitih staničnih linija kao što su alveolarne epitelne (A549) stanice. Cilj ovog istraživanja bio je ispitati utjecaj sušenja na kultivabilnost, vijabilnost i patogenost dviju vrsta bakterija roda Legionella. Kultivabilnost je praćena nasađivanjem na BCYE podlozi, vijabilnost LIVE/DEAD tehnikom fluorescentnog bojenja, a patogenost kokultivacijom VBNC oblika bakterija s Achantamoeba castellanii i infekcijom A549 stanica. U ovom istraživanju, bakterije su pripremljene u sterilnoj vodi. Po 20 μl bakterijske suspenzije (~10(8) CFU/ml) nakapano je na mikrotitar pločicu u 5 rupica te izloženo laminarnom strujanju zraka u sterilnoj komori kroz 1 sat. Sušene bakterije, kao i kontrolna bakterijska suspenzija u vlažnim uvjetima, čuvane su na sobnoj temperaturi. U različitim vremenskim intervalima, bakterije su rehidrirane i kultivirane na BCYE agaru. Bakterijske stanice izložene sušenju dodane su A. castellanii i inkubirane 48 sati u PAGE mediju. Inkubacija A549 stanica inficiranih bakterijskim stanicama izloženima sušenju trajala je 2 sata nakon čega su razarane i nasađivane u deseterostrukim razrijeđenjima na BCYE podlogama. 3, 7 i 10 dan sušenja bakterijske suspenzije ispitivana je vijabilnost LIVE/DEAD tehnikom fluorescentnog bojenja. Nakon rehidracije obje vrste moguće je kultivirati na BCYE agaru samo nakon 1 dana izlaganja sušenju. Nakon 15 dana sušenja legionele su sposobne inficirati amebe i razmnožavati se unutar njih, dok u kulturi alveolarnih epitelnih stanica (A549) i L. pneumophila i L. longbeachae adheriraju i internaliziraju do 4 dana nakon izlaganja suhim uvjetima. LIVE/DEAD postupkom dokazano je kako obje vrste legionela i deseti dan nakon što su bile izložene sušenju, zadržavaju svojstvo vijabilnosti. Izlaganjem suhim uvjetima, L. pneumophila i L. longbeachae brzo gube kultivabilnost, ali svojstvo vijabilnosti i patogenosti zadržavaju 15 dana nakon podvrgavanja sušenju zbog čega mogu predstavljati opasnost za ljude.

Izvorni jezik
Hrvatski

Znanstvena područja
Temeljne medicinske znanosti, Kliničke medicinske znanosti



POVEZANOST RADA


Projekt / tema
062-0621273-1275 - Patogeneza eksperimentalne legioneloze (Miljenko Dorić, )

Ustanove
Medicinski fakultet, Rijeka