hrvatski

Inhibicija kinaze mTOR pojačava djelovanje arsenova trioksida (ATO) na stanice akutne mijeloične leukemije (AML)

UVOD I CILJ: ATO i sve-trans-retinska kiselina (ATRA) koriste se u terapiji akutne promijelocitne leukemije (APL). Proapoptotički učinci ATO-a zabilježeni su i na drugim podtipovima AML in vitro, ali u potencijalno toksičnim dozama. Toksičnost se pokušava smanjiti kombiniranjem nižih doza ATO-a s agensima koji pojačavaju njegov učinak. Kinaza mTOR dio je signalnog puta koji nadzire staničnu proliferaciju i preživljenje. Cilj rada je ispitati učinak rapamicina, inhibitora mTOR, na djelovanje ATO-a u različitim podtipovima AML. METODE: Stanične linije NB4, HL60, U937, KG-1 i K562 izložene su djelovanju ATO-a, rapamicina, ATRA-e i njihovih kombinacija. Nakon inkubacije, broj stanica je određen tripanskim modrilom i hemocitometrom, diferencijacija izražajem CD11b, a količina DNA obilježavanjem propidijevim jodidom. Periferna je krv uzeta i od 3 reprezentativna pacijenta (de novo AML, AML u relapsu i sekundarna AML). Mononukleari su izdvojeni gradijentom gustoće i inkubirani tijekom 24h na plastičnoj podlozi. Blasti su potom inkubirani u mediju tijekom 96h u prisutstvu ATO-a +/- rapamicin ili ATRA, a stupanj proliferacije je određen testom MTT. REZULTATI: U staničnim linijama ne-APL AML, kombinacija rapamicina i ATO statistički značajno smanjuje broj živih stanica nakon 96h, a nema učinka na izražaj CD11b. Rapamicin povećava udio stanica u G0/G1- fazi staničnog ciklusa. Stanice uzete ex vivo pokazale su različitu osjetljivost na ATO, a dodatak ATRA-e i rapamicina kod uzoraka osjetljivih na ATO u različitoj mjeri pojačava taj učinak. ZAKLJUČAK: Rapamicin i ATRA pojačavaju djelovanje ATO-a na stanične linije i primarne stanice AML ex vivo. Kombinacija ATO-a i inhibitora mTOR pokazuje terapijski potencijal i u ne-APL AML. Biološke osobine stanica koje uzrokuju razlike u odgovoru na ove agense još se trebaju istražiti.

mTOR kinaza; arsenov trioksid; akutna mijeloična leukemija

nije evidentirano