Obilježavanje kloroplastne senzorske kinaze (CSK) afinitetnim biljezima HA i FLAG (CROSBI ID 371238)
Ocjenski rad | diplomski rad
Podaci o odgovornosti
Marinović, Mila
Fulgosi, Hrvoje
hrvatski
Obilježavanje kloroplastne senzorske kinaze (CSK) afinitetnim biljezima HA i FLAG
U genomu biljke Arabidopsis thaliana (L.) Heynh identificiran je gen At1g67840 koji kodira za protein kloroplastnu senzorsku kinazu (CSK), dio „drevnih“ dvokomponentnih signalnih sustava. Analizom aminokiselinskog slijeda utvrđena je visoka sačuvanost i sličnost određenih motiva u svih vaskularnih biljaka i algi te je protein CSK tip bakterijske senzorske histidinske kinaze utvrđene u fotosintetskim plastidima tj. kloroplastima. Cilj ovog rada je obilježavanje CSK proteina afinitetnim biljezima HA i FLAG u svrhu funkcionalne i strukturalne karakterizacije senzorske kinaze i specifičnijeg utvrđivanja njene uloge kod biljke Arabidopsis thaliana. Lančanom reakcijom polimerazom fuzionirali smo biljege HA i FLAG na karboksi terminalni kraj CSK proteina. Koristeći „Gateway“ rekombinacijsku tehnologiju konstrukt CSK_HA_FLAG ugrađuje se u ishodišni pENTR (engl. entry) vektor te naknadno u binarni pH7WG2, 0 vektor. Nadalje, stanice agrobakterija EHA105 transformirane su s konstruktom pH7WG2, 0-CSK_HA_FLAG s ciljem daljnje ugradnje CSK_HA_FLAG komponente prisutne u T-DNA regiji binarnog vektora u genom biljke Arabidopsis thaliana. Ovim postupkom u transformiranim biljkama CSK-KO (engl. knock-out), inaktiviran je gen At1g67840.
Arabidopsis thaliana; CSK; dvokomponentni sustavi; senzorske kinaze
nije evidentirano
engleski
Tagging of the chloroplast sensor kinase (CSK)with affinity epitopes HA and FLAG
nije evidentirano
Arabidopsis thaliana; CSK; two-component systems; sensor kinases
nije evidentirano
Podaci o izdanju
59
11.11.2011.
obranjeno
Podaci o ustanovi koja je dodijelila akademski stupanj
Prirodoslovno-matematički fakultet, Zagreb
Zagreb