hrvatski

Primjena lančane reakcije polimerazom i imunoenzimnih testova za glikoprotein 44/48 (E0) i protein 120 u dokazivanju soja Kina virusa svinjske kuge u krvi i organima svinja.

Lančana reakcija polimerazom i imunoenzimni testovi rabljeni su za dokazivanje virusa svinjske kuge soja Kina u uzorcima krvi i organa pokusno inokulirane prasadi. Jednoj skupini prasadi bio je inokuliran soj K umnožen u kunićima, a drugoj isti soj umnožen u staničnoj kulturi MPK. Pretraženi su uzorci krvi uzeti na dan aplikacije virusa te 2., 4., 6., 8., 10., 13. i 16. dana. Uzorci slezena, tonzila i mozgova uzeti su od prasadi žrtvovanih 6., 8., 10., 13. i 16. dana nakon inokulacije. Navedeni uzorci su pretraženi na prisutnost glikoproteina E0 i proteina p125 virusa svinjske kuge komercijalnim imunoenzimnim testovima. Za umnožavanje i dokaz RNA virusa svinjske kuge izabrana je regija specifična za pestiviruse unutar 5' nekodirajućeg kraja, duljine 298 bp. U drugom krugu umnožavanja rabljene su početnice kojima je umnožen dio odsječka duljine 133 bp, specifičan za virus SK. Nazočnost virusa dokazana je sve do 16. dana nakon inokulacije. Umrežena lančana reakcija polimerazom uz prethodnu reverznu transkripciju (RT-PCR) pokazala se osjetljivijom od imunoenzimnih testova. Imunoenzimni test za dokazivanje proteina p125 bio je osjetljiviji od testa za dokazivanje glikoproteina E0. Odsječak genoma soja K umnoženog u staničnoj kulturi je u krvi RT-PCR-om dokazan već 2. dana nakon inokulacije. Soj Kina umnožen u staničnoj kulturi dokazan je u samo jednom uzorku mozga, za razliku od virusa umnoženog u kunićima koji je dokazan u sedam od deset uzoraka mozgova.

lančana reakcija polimerazom; imunoenzimni test; virus svinjske kuge; soj Kina.

nije evidentirano