hrvatski

Analitička procjena sustava za umnažanje DNA u stvarnom vremenu Rotor-Gene 3000

Lančana reakcija polimerazom u realnom vremenu (Real-Time Polymerase Chain Reaction, RQ-PCR) je metoda koja omogućava preciznu kvantifikaciju nastalih PCR produkata, za vrijeme eksponencijalne faze procesa umnažanja što je u potpunoj suprotnosti s klasičnom PCR metodom krajnje točke. Rotor-Gene je otvoreni sustav za detekciju umnažanja DNA u realnom vremenu. Podržava sve poznate real-time kemije: SYBR ual-labeled probe, MGB probe, FRET i molecular beacons probe. Analitička procjena izvršena je na primjeru nalaza BCR-ABL uzijskog transkripta kod bolesnika s kroničnom mijeloičnom leukemijom. Rezultati analitičke validacije procjene dokazali su prisutnost mjerljive količine BCR-ABL fuzijskog transkripta, kvantitativno, u 8 od 9 kvalitativno pozitivnih uzoraka (osjetljivost od 89.9%).RQ-PCR je vrlo osjetljiva metoda, ali ne u svakom slučaju. Podatci mogu biti kvantificirani ukoliko je nivo minimalne ostatne bolesti unutar ponovljivog raspona (isti ili viši od ponovljive osjetljivosti). Uzorak se može smatrati pozitivnim ukoliko je Ct vrijednost barem za jedan ciklus niže od najniže Ct vrijednosti nespecifičnog umnažanja. Vro niske vrijednosti minimalne ostatne bolesti moraju se procjenjivati s oprezom i ponoviti ispitivanje.Validirani instrument može se primjeniti u kliničke svrhe, ali obzirom na mali broj ispitanih uzoraka, bilo bi vrijedno nastaviti ispitivanje u okviru proširene analitičke validacije

analitička evaluacija; DNA analizator

nije evidentirano