hrvatski

Posljedice nedostatka proteina FADD na aktivaciju kaspaza

Protein FADD je adapterski protein vanjskog puta apoptoze koji nakon stimulacije receptora smrti prenosi signal na kaspazu 8 i time aktivira izvršenje stanične smrti. U nedostatku FADD-a, apoptoza uzrokovana stimulacijom receptora smrti je blokirana. Kod nekih tumora je primijećen nedostatak tog adapterskog proteina te se smatra da na taj način stanice tumora mogu izbjeći imunološki odgovor domaćina i pojačati rezistenciju na kemoterapiju. Također je utvrđeno da nedostatak proteina FADD može pospješiti staničnu smrt nakon stimulacije receptora. Ovim istraživanjem želimo istražiti mehanizam kojim nedostatak proteina FADD utječe na staničnu smrt nakon stimulacije staničnih receptora UVB zračenjem. Staničnu smrt smo inducirali UVB zračenjem raspona energije 100 do 600 J. Uvrdili smo da su stanice bez FADD proteina (FADD-/-) osjetljivije na UVB zračenje u odnosu na divlji tip, preživljenje im je lošije, a oporavak sporiji. Stanice su zračene i uz dodatak inhibitora programirane nekroze te smo pokazali da je preživljenje stanica divljeg tipa bolje dok je preživljenje FADD-/- stanica ostalo nepromijenjeno. Kako bi utvrdili uzrok smanjenog preživljenja analizirali smo aktivnost izvršiteljskih kaspaza 3 i 7 te inicijatorskih kaspaza 8 i 9. Kod FADD-/- stanica smo utvrdili pojačanu aktivnost kaspaza 3, 7 te utvrdili da je za tu aktivnost odgovorna aktivacija kaspaze 9 koja je karakteristična za unutarnji, mitohondrijski put apoptoze. Iz naših rezultata možemo zaključiti da divlji tip stanica nakon zračenja umire apoptozom i nekroptozom. FADD-/- stanice nakon zračenja umiru apoptozom koja se aktivira isključivo preko kaspaze 9, odnosno unutarnjeg puta, vjerojatno preko DNA oštećenja. FADD-/- stanice također pokazuju lošiji oporavak nakon zračenja te bi trebalo istražiti da li je nedostatak proteina FADD onemogućio signalizaciju zaustavljanja apoptoze nakon uspješnog DNA popravka.

FADD; kaspaze; apoptoza; UV

nije evidentirano