hrvatski

Utjecaj lipidne peroksidacije na aktivnost fosfolipaze C

Oksidativni stres je citotoksično stanje koje se javlja uslijed povećanog stvaranja reaktivnih kisikovih vrsta (ROS) i/ili smanjenja kapaciteta antioksidativnih sustava, a koje rezultira oštećenjem DNA, proteina, ugljikohidrata i lipidnom peroksidacijom. Dosadašnje studije pokazuju kako je oksidativni stres važan čimbenik u patogenezi neurodegenerativnih bolesti, no točan mehanizam njegove uključenosti nije razjašnjen. Jedan od pretpostavljenih mehanizama uključuje aktivaciju fosfolipaze C (PLC), membranskog enzima koji katalizira hidrolizu inozitol-fosfolipida, a za kojeg je dokazano da sudjeluje u modulaciji preživljenja i smrti stanica. Cilj ovog rada je bio stoga u uvjetima in vitro ispitati postoji li povezanost lipidne peroksidacije, jedne od posljedice oksidativnog stresa, i aktivnosti PLC. U radu je korišten homogenat mozga štakora u kojem je vodikovim peroksidom (H2O2) i željezovim sulfatom (FeSO4) izazvana, a α-tokoferolom i Troloxom spriječena lipidna peroksidacija, te je u navedenim uvjetima mjerena aktivnost PLC. Lipidna peroksidacija je mjerena određivanjem produkta malondialdehida (MDA) HPLC metodom, dok je aktivnost PLC mjerena PLC test kitom. Pri rasponu koncentracija 0, 01-2 mM H2O2 nije uzrokovao porast razine MDA, dok je FeSO4 doveo do značajnog porasta razine MDA pri rasponu koncentracija 0, 03-2 mM. α-tokoferol i Trolox u potpunosti su spriječili lipidnu peroksidaciju izazvanu s FeSO4, pri čemu je Trolox iskazao jači antioksidativni učinak. Porast lipidne peroksidacije u homogenatu mozga je blago smanjio aktivnost PLC, dok je u uvjetima spriječene lipidne peroksidacije u prisutnosti α−tokoferola i Troloxa, aktivnost PLC bila značajno smanjena, odnosno povećana. Dobiveni rezultati ne ukazuju na povezanost lipidne peroksidacije i aktivnosti PLC, no može se zaključiti kako α-tokoferol i Trolox utječu na aktivnost PLC neovisno o antioksidativnom učinku u procesu lipidne peroksidacije. Ipak, zbog uvjeta ispitivanja, povezanost oksidativnog stresa i PLC ne treba se isključiti, te su potrebne dodatne studije kako bi se razotkrio mehanizam u pozadini učinka α-tokoferola i Troloxa na aktivnost PLC te moguća uključenost navedenog enzima u stanično oštećenje i smrt uzrokovano oksidativnim stresom.

oksidativni stres; lipidna peroksidacija; fosfolipaza C; α-tokoferol; Trolox

nije evidentirano