Određivanje optimalnih uvjeta aktivnosti proteina YblCcw12p eksprimiranog u kvascu Saccharomyces cerevisiae (CROSBI ID 367802)
Ocjenski rad | sveučilišni preddiplomski završni rad
Podaci o odgovornosti
Didak, Blanka
Teparić, Renata
hrvatski
Određivanje optimalnih uvjeta aktivnosti proteina YblCcw12p eksprimiranog u kvascu Saccharomyces cerevisiae
U posljednje vrijeme raste interes za biotehnološku primjenu enzima imobiliziranih na površinu stanica domaćina koja tada ujedno djeluje kao producent i nosač imobiliziranog enzima. Od posebne važnosti su heterologni proteini vezani na staničnu stijenku kvasca Saccharomyces cerevisiae, budući da je kvasac nepatogeni mikroorganizam koji se lako transformira i uzgaja, a kao eukariot je pogodniji za ekspresiju enzima sisavaca nego bakterijske stanice. U ovom radu je karakterizirana enzimska aktivnost rekombinantne nukleaze YblCcw12p koja je dobijena fuzijom gena za intracelularnu nukleazu kvasca Yblp i gena za protein stanične stijenke Ccw12p preko kojeg je onda rekombinantni protein usidren u stijenku. U radu je pokazano da je rekombinantni enzim uspješno imobiliziran na površini stanice i da ima nukleaznu aktivnost. Za detekciju enzimske aktivnosti korištene su elektroforeza i SRED metoda koje su detaljno opisane u radu. Nadalje je provedena optimizacija metode za mjerenje enzimske aktivnosti modificiranjem metode po Kunitz-u, te su određeni optimalni uvijeti za aktivnost rekombinantnog enzima.
rekombinantni protein; DNazna aktivnost; Saccharomyces cerevisiae
nije evidentirano
engleski
Determination of optimal conditions for activity of protein YblCcw12p expressed in yeast Saccharomyces cerevisiae
nije evidentirano
recombinant proteins; DNase activity; Saccharomyces cerevisiae
nije evidentirano
Podaci o izdanju
30
29.06.2011.
obranjeno
Podaci o ustanovi koja je dodijelila akademski stupanj
Prehrambeno-biotehnološki fakultet
Zagreb