hrvatski

STRUKTURNA KARAKTERIZACIJA TELOMERA NORMALNIH LJUDSKIH FIBROBLASTA

Istraživanja strukture i funkcije telomera su bitna za razumijevanje procesa kontrole staničnog rasta, staničnog starenja i imortalizacije. Skraćivanje telomera predstavlja glavni molekularni mehanizam koji ograničava rast normalnih stanica, a njihovo produžavanje je glavni mehanizam održavanja besmrtnosti tumorskih stanica. Pri tome je izuzetno važno pratiti ponašanje telomera sestrinskih kromatida kao pokazatelja molekularnih zbivanja na telomerama. Stoga sam pomoću kvantitativne PNA-FISH metode detaljno pratila ova zbivanja tijekom staničnog starenja MJ90 stanica. Razlike između sestrinskih kromatida koje su uočene u uzorcima su veće i učestalije nego što bi se to moglo pripisati postepenom skraćivanju telomera uslijed kreiranja -3' jednolančanih krajeva nakon replikacije genomske DNA. Ovome bi moglo biti više uzroka, od manjkave hibridizacije što rezultira razlikama u obilježavanja lanaca DNA, složenosti supra struktura telomerne DNA, tj. t-petlje i vezanih proteina, do razlika u postreplikacijskoj obradi novonastlih telomernih lanaca. Kako su telomere dinamične strukture koje se stalno mijenjaju, za to im je potrebna adekvatna regulacija telomernih proteina. TRF1 je među prvim izoliranim telomernim proteinima. Homodimeri TRF1 stabiliziraju telomernu petlju (t-petlju), a kako se vežu čitavom duljinom telomerne sekvence, količina ovog proteina često je pokazatelj prosječne duljine telomera. Određivanje broja TRF1 dimera na telomeri otvorilo mi je mogućnost istraživanja konformacije telomere što je od velike važnosti za određivanje prostorne strukture telomera u stanicama.

skraćivanje telomera; Q-PNA-FISH; normalni ljudski fibroblasti; TRF1; struktura telomera

nije evidentirano