hrvatski

Metalo-beta-laktamaze u kliničkih sojeva Pseudomonas aeruginosa otpornih na karbapenemske antibiotike

Posljednih 20-ak godina u Pseudomonas aeruginosa sve češće se opisuju stečene β-laktamaze tzv. metalo-β-laktamaze koje mogu biti VIM, IMP, GIM, SPM i AIM tipa, a hidroliziraju sve poznate β-laktame s izuzetkom aztreonama. Cilj ovog rada bio je fenotipski i molekularno utvrditi postojanje i vrstu metalo-β-laktamaza u kliničkih izolata P. aeruginosa otpornih na karbapeneme te utvrditi njihovo kliničko-epidemiološko značenje, genetsku srodnost, odnos serotipova i rezistotipova te provjeriti pouzdanost laboratorijskih metoda u testiranju osjetljivosti P. aeruginosa na antibiotike. U razdoblju od 2001. do 2007. godine prikupljeno je ukupno 169 izolata P. aeruginosa sa smanjenom osjetljivošću na karbapeneme s kliničkih odjela. Svim izolatima određena je osjetljivost prema antipseudomonasnim antibioticima disk difuzijskom i mikrodilucijskom metodom (za ceftazidim i s dodatkom klavulanske i boroničke kiseline ; za imipenem s dodatkom EDTA i fenantrolina), određen im je O-serotip te genetska srodnost uspoređena elektroforezom u pulzirajućem polju. Odnosom MIK-ova antibiotika procijenjena je aktivnost efluksnih crpki. Proteini vanjske membrane detektirani su SDS-PAGE elektroforezom. Geni koji kodiraju metalo-β-laktamaze blaVIM i blaIMP istraženi su lančanom reakcijom polimeraze. Nizom parova početnica amplificiran je i sekvenciran integron koji sadržava gen za metalo-β-laktamazu. Statistički su obrađeni klinički podatci bolesnika dobiveni retroaktivno iz anketnog listića koji je pratio svaki izolat pseudomonasa. U šest izolata dokazano je prisustvo VIM-2 metalo-β-laktamaze. Gen se nalazio u sastavu prve genske kazete u do sada neopisanom integronu lociranom na kromosomu nazvanom InCRO, ukupne veličine 3277 parova baza. MBL pozitivni izolati pripadali su dvama klonovima i serotipovima O11 i O12. Otpornost na karbapeneme ostalih izolata P. aeruginosa posljedica je hiperekspresije ampC β-laktamaze, nepostojanja proteina vanjske membrane OprD i pojačanog rada efluksnih crpki. Usporedba genotipova P. aeruginosa ukazala je na dominaciju dva klona, multirezistentnog klona P. aeruginosa O12 i drugog, u kojem prevladava serotip O11. Bolesnici s multirezistentnim izolatima pseudomonasa dulje su hospitalizirani i imaju veći mortalitet u odnosu na bolesnike koji nemaju multirezistentne izolate. Laboratorijske metode testiranja osjetljivosti P. aeruginosa na antibiotike nepouzdane su i podložne varijacijama.

Pseudomonas aeruginosa; metalo-beta-laktamaze; karbapenemi

nije evidentirano