hrvatski

Učinak okratoksina A na apoptozu i razinu staničnog ATP-a u RK 13 i LLC-PK1 bubrežnim stanicama

Okratoksin A (7-karboksi-5-kloro-3, 4-dihidro-8- hidroksi-3-metilizokumarin) je sekundarni metabolit pojedinih vrsta plijesni roda Aspergillus, Penicillium te Eurotium. Toksin je svjetski javno zdravstveni problem, kontaminira hranu biljnog i životinjskog podrjetla te tako može ugrožavati zdravlje ljudi i životinja. Okratoksin A djeluje kao nefrotoksični, hepatotoksični, genotoksični i karcinogeni činitelj, upliće se u mehanizam koagulacije krvi, te djeluje imunosupresivno. Cilj ovog rada je ispitati učinak okratoksina A na staničnu smrt i koncentraciju ATP-a budući da preživljavanje stanica u znatnoj mjeri ovisi o razini unutarstaničnog >ATP-a. Morfološka karakterizacija i određivanje katalitičke koncentarcije laktat-dehidrogenaze poslužit će za ispitivanje nekrotičnih odnosno apoptotičkih promjena u kultiviranim zečjimi svinjskim bubrežnim stanicama (RK 13, LLC-PK1). Uzgajali smo bubrežne stanice u RPMI mediju obogaćenom s 10 % fetalnim goveđim serumom, na 370C i uz 5 % CO2. Stanice su zatim tretirane tijekom 24 sata okratoksinom A (2.5-25  g/ml medija). Povećanjem koncentracije Okratoksina A značajno se smanjuje broj živh RK 13 i LLC-PK1 stanica. Koncentracije OTA od 5  g rezultiraju smanjenjem broja RK 13 živih stanica na 50 %, a LLC-PK1 smanjenjem na ( % prema odgovorajućim kontrolnimuzorcima, što ukazuje na veću osjetljivost LLC-PK1 u odnosu na RK 13. Apoptoza je kod LLC_PK1 stanica prisutna u većoj mjeri (204 apoptotičke stanice na 1000 u odnosu na 133 apoptotičkih kod RK 13 stanica također na 1000 stanica).

Okratoksin A ; apotoza ; nekroza ; ATP ; RK 13 ; LLC-PK1

Biochemia Medica 9 (1999) 1/1 57-57