hrvatski

Proučavanje miševa koji nose umetak genske zamke u genima eksprimiranim tijekom embrionalnog razvitka

U cilju otkrivanja novih gena važnih u razvitku zametka primijenili smo metodu genske zamke. Embrionalne matične stanice miša genetski su promijenjene DNK umetkom koji sadržava primalac prekrajanja ispred stopljenih gena lacZ i neoR, bez vlastitog promotora. Ubačeni geni su aktivni samo ako se nađu unutar nekog gena embrionalnih matičnih stanica, koji na taj način biva uhvaćen u gensku zamku. Od odabranih klonova embrionalnih matičnih stanica stvorene su linije miševa, od kojih dalje istražujemo tri linije u kojima su promijenjena tri različita gena. Dva gena su do sada nepoznati geni kosenic i lobel, a treći je već poznati gen Nol1, koji određuje s umnažanjem povezanu jezgričinu bjelančevinu p120. Kosenic i lobel su eksprimirani tijekom razvitka živčanog sustava i srca. Njihova ekspresija započinje kod zametaka strih 10.5 dana i traje sve do odrasle dobi. Lobel je eksprimiran u cijeloj osnovi srca, a kosenic samo u osnovi srčanog trabekularnog sustava. U neuralnoj cijevi ekspresija ova dva gena je obraničena na njezin ventralni dio, na područje budućih motornih neurona kralješnične moždine. Oba su gena eksprimiranan u mozgu odraslog miša. Treći gen Nol1 aktivan je u svim strukturama zametka, ali ne u svim njegovim stanicama. Zanimljiva je njegova unutarstanična ekspresija u jezgrici. Međusobnim sparivanjem heterozigotnih nosioca umetka genske zamke unutar gena Nol1 nismo dobili homozigotne potomke, pa pretpostavljamo da je poremećaj gena Nol1 letalan.

genska zamka; zametak; miš

nije evidentirano