hrvatski

Utjecaj utišanog p27 na proliferaciju MCF-7 stanica u uvjetima oksidativnog stresa i gladovanja

Stanični ciklus se sastoji iz dva dijela: interfaze i mitoze. Interfaza se sastoji iz G1, S, G2 i M-faza. Pravilno odvijanje staničnog ciklusa kontrolira obitelj serin-treonin- kinaza, tzv. ciklin ovisne kinaze (CDK). Aktivnost CDK je pod utjecajem pozitivnih i negativnih regulatora. Pozitivni regulatori aktivnosti CDK su ciklini, dok su negativni regulatori CKI, (Cip/Kip i INK4). Cip/Kip proteini (p21, p27 i p57) vežu se na ciklin/CDK komplekse i na taj način ih inhibiraju. p27 je ključni faktor prijelaza iz G1 u S-fazu vezanjem za ciklin E/CDK2 kompleks. Ovim istraživanjem je ispitan utjecaj utišavanja p27 na proliferaciju i apoptozu u uvjetima oksidativnog stresa i izgladnjavanja MCF-7 tumorskih stanica. Utišavanje p27 postignuto je metodom transfekcije pomoću pakirajućih stanice Phoenix sa sh RNA plazmidom te infekcijom MCF-7 stanica. Stanice su tretirane s H2O2 i medijem bez seruma. Rezultati su pokazali da je proliferacija MCF-7 sh stanica bila znatno viša u odnsu na MCF-7 wt, međutim čini se da su i drugi putevi odgovorni za zaustavljanje staničnog ciklusa u uvjetima gladovanja. Ekspresija regulatornih proteina staničnog ciklusa varira u odnosu na tretman stanica kao i o tome da li se radi o wt ili sh tipu MCF-7 stanica. Rezultati su pokazali aktivaciju proteina AIF, što ukazuje da oba tretmana nduciraju apoptozu u MCF-7 stanicama. Sve je veći interes istraživanja funkcija proteina p27 kao ciljne molekule u terapiji različitih vrsta tumora.

p27; stanični ciklus; oksidativni stres; gladovanje

Rad je prijavljen na kolegiju Molekularna biologija Farmaceutsko biokemijskog fakulteta, pod komentorstvom doc. dr. sc. Gordane Maravić Vlahoviček.