hrvatski

Mehanizam djelovanja interferona-gama na stanice leukemijske linije HL-60

Biokemijski mehanizmi prijenosa signala kojima su posredovani učinci interferona-gama (IFN-gama) na diferencijaciju stanica humane leukemije HL-60 nisu u potpunosti razjašnjeni. Nedavna su istraživanja utvrdila postojanje sfingomijelinskog (SM) kruga koji se aktivira u odgovoru na vezanje IFN-gama u stanicama HL-60, ali nije istražen mehanizam kojim IFN-gama pobuđuje hidrolizu SM. U ovome radu istražuju se rana biokemijska zbivanja koja posreduju učinak IFN-gama na SM pregradnju, te njihova uloga u diferencijaciji stanica HL-60. Izlaganje stanica IFN-gama ne utječe na koncentraciju 1,2-diacilglicerola, unutarstaničnog kalcija i aktivnost fosfolipaze D. IFN-gama pobuđuje rano otpuštanje arahidonske kiseline (AA) iz stanica HL-60, a učinak se poništava prethodnim izlaganjem stanica toksinu pertusisa što upućuje na uključenost G_i-proteina osjetljivog na toksin pertusisa u posredovanju učinaka IFN-gama na aktivaciju fosfolipaze A_2(PLA_2). 4-120 h nakon podraživanja stanica s IFN-gama zamijećen je vjerodostojni porast aktivnosti u membranama i citosolu, te odgovarajući porast količine imunoreaktivnog proteina cPLA_2 u oba stanična odjeljka. IFN-gama rano pobuđuje hidrolizu SM, a najopsežnija hidroliza (približno 30%) zamjećuje se nakon 30 minuta. Melitin, aktivator PLA_2, i AA oponašaju učinke IFN-gama na hidrolizu SM. Prethodno izlaganje stanica bromofenacil-bromidu (BPB), inhibitoru PLA_2, poništava učinak IFN-gama na hidrolizu SM, a učinak se prevladava dodatkom AA. Dugotrajno izlaganje (5 dana) stanica HL-60 IFN-gama uzrokuje porast aktivnosti redukcije NBT i nespecifičnih esteraza (NSE) te povećava izraženost FcgamaRI (CD64) bez vjerodostojnih učinaka na broj stanica, adherenciju ili fagocitnu aktivnost. Inkubacija stanica s AA ili melitinom pobuđuje izraženost CD64, NBT i NSE u istoj mjeri kao i IFN-gama, a kombinacije IFN-gama i AA ili IFN-gama i melitina ne pokazuju dodatnog učinka. Izlaganje stanica indometacinu, inhibitoru ciklo-oksigenaze, i NDGA, inhibitoru lipo-oksigenaze nije imalo vjerodostojnog učinka. Ova istraživanja upućuju na ključnu ulogu PLA_2/AA, kao ranog biokemijskog zbivanja potaknutog zauzećem receptora IFN-gama, u posredovanju učinaka IFN-gama na pobuđivanje SM kruga i fenotipskih promjena prispodobivih diferencijaciji stanica HL-60 ka monocitnoj liniji.

interferon-gama; leukemijska stanična linja HL-60; mehanizam djelovanja

nije evidentirano