hrvatski

Studij enzimskog procesa razgradnje kolagenske sirovine

U ovom je radu proučavan proces razgradnje kolagenske sirovine kataliziran keratinazom iz gljive Doratomyces microsporous. Kao kolagenska sirovina upotrebljena je sirova teleća koža. Sirova keratinaza je pripremljena postupkom submerzne fermentacije i metodama izolacije (filtracija, ultrafiltracija i liofilizacija) te je provedena njena karakterizacija. Ispitivan je utjecaj pH, temperature i stabilizatora (Ca2+ iona) na stabilnost sirove keratinaze, pri čemu su kao supstrati korišteni hemoglobin i kazein. Stabilnost sirove keratinaze povećana je umrežavanjem s 0,5%-tnom otopinom glutardialdehida, Praćenjem vremenske deaktivacije sirove i umrežene sirove keratinaze procijenjene su konstante deaktivacije enzima(kd). Rezultati pokusa su uspoređeni s rezultatima simulacije procesa pomoću modela u cilju ocjene valjanosti matematičkog modela deaktivacije enzima. Keratinaza je najstabilnija u tris/HCl puferu, pH 8, pri temperaturi 20 oC. Na temelju rezultata pokusa, provedenih s različitim početnim koncentracijama sirove teleće kože, izračunate su početne brzine procesa. Pomoću parova podataka koncentracija supstrata-početna brzina procesa procijenjeni su parametri izraza Michaelis-Mentenove kinetike uz kompetitivnu inhibiciju produktom; Vmax, Kms,Kip. Za proces zargradnje kolagenske sirovine postavljen je matematički model koji uključuje Michaelis-Mentenov kinetički izraz te utjecaj koncentracije otopljenih proteina na kinetičku konstantu (k) i konstantu deaktivacije enzima (kd). U cilju ocjene valjanosti postavljenog modela provedeni su pokusi razgradnje kolagenske sirovine u kotlastom reaktoru sa sirovo, keratinazom, umreženom sirovom keratinazom i komercijalnom Proteinazom K imobiliziranom na čvrsti nosilac Eupergit. Usporedba rezultata pokusa i rezultata simulacije procesa pomoću modela pokazala je da model dobro opisuje proces pri danim uvjetima.

keratinaza; matematički model procesa; razgradnja kolagenske sirovine; stabilnost

nije evidentirano